77问答网
所有问题
RT-PCR根据什么序列设计引物
如题所述
举报该问题
推荐答案 2019-06-27
我也做得rt-pcr,是提取某物种中未测序的一段基因。是用近缘物种基因进行比对,得到保守序列设计引物,再提取总rna,rt-pcr得到目的基因的片段
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://77.wendadaohang.com/zd/YNvYWWqvGNqW38NpvI.html
相似回答
RT-PCR根据什么序列设计引物
答:
根据CCDS区设计
,可以设计跨内含子或不跨内含子,从3‘端开始寻找适合的下游引物,然后往上寻找适合的上游引物,扩增片段大概150~200bp
RT -PCR
合成cDNA
引物
的选择
答:
在进行
RT-PCR
合成cDNA的过程中,
引物
的选择至关重要。首先,对于难以完全拷贝的特定mRNA,可以使用随机六聚体引物。这种非特异性引物让体系中的所有RNA分子都参与cDNA的第一链合成,PCR扩增过程中会赋予所需的特异性。然而,值得注意的是,通常采用随机六聚体合成的cDNA中,约有96%来自rRNA。相比之下,O...
常用的植物病毒分子检测诊断技术有
哪些
?
答:
用已知病毒核酸保守序列设计引物
,分别提取病、健植物总RNA为模板,进行RT-PCR反应,琼脂糖或PAGE电泳检测扩增结果。感病材料会出现特异扩增带。如香石竹斑驳病毒(Carnation mottle virus,CarMV)。根据该病毒的RNA序列设计引物,P1引物(5′端引物,与CarMV RNA的2516~2538同源):5′-〔TTA,GTT,TG...
RT-PCR
技术
引物
的选择
答:
能够显著提高实验的效率和准确性。总之,选择合适的RT-PCR引物取决于实验的特定需求,
包括RNA类型、目标序列的已知程度以及对样品质量的控制
。随机引物和基因特异性引物各有适用场景,而Oligo dT引物对于PolyA尾巴RNA的处理需要特别注意样品质量。在实验设计时,应根据实际情况来决定最适宜的引物类型。
RT
-qPCR 基本原理
答:
用于
RT
-qPCR 中 qPCR 步骤的
PCR
引物
最好应
设计
成跨越一个外显子-外显子连接,其中一条扩增引物可以潜在地跨越实际外显子-内含子边界(图4)。由于含内含子的基因组 DNA
序列
不会被扩增,因此这种设计可以减少从污染的基因组DNA中扩增得到的假阳性的风险。如果引物不能被设计成能够分离外显子或...
RT-PCR
的原理是
什么
?有何用途?
答:
RT
—
PCR
(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。原理是提取组织或细胞中的总RNA或者mRNA,在反转录酶的作用下将RNA或者mRNA反转录成cDNA,再以该cDNA第一链为模板进行PCR扩增,
根据
靶基因
设计
用于PCR扩增的基因特异的上下游...
...不知道模板DNA的核酸
序列
的情况下如何
设计PCR引物
?求高手给出具体步...
答:
一般来说,RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以得出这种基因在进化过程中的保守序列,
根据这个保守序列设计引物来PCR
,扩增出来的机率就大多了。
大家正在搜
根据基因序列设计引物
不知道序列怎么设计引物
设计引物序列的依据
设计引物序列的主要依据
知道基因序列怎么设计引物
如何设计引物序列
已知序列如何设计引物
NCBI如何查找引物序列
m13引物序列
相关问题
RT-PCR根据什么序列设计引物
RT-PCR的引物如何设计?
做RT-PCR设计引物时,找引物序列有哪些好方法?
根据GenBank中p53基因的部分序列),设计引物,确定R...
rt-pcr和pcr引物设计为什么会有不同
怎样看rt-pcr设计的引物是否跨过内含子
RT-PCR中逆转录后,PCR步骤的引物设计
RT-PCR是什么