请问在PCR实验中，如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物？求高手给出具体步骤啊

最近一直在学PCR.求各位高手不吝赐教啊

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推荐答案 2010-05-01

一般来说，RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列，可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因，多找几种，用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列，这样可以得出这种基因在进化过程中的保守序列，根据这个保守序列设计引物来PCR，扩增出来的机率就大多了。

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第1个回答 2010-04-29

啊？？？？？总要知道点什么的吧？？

比如你想扩增猩猩的血红蛋白基因，而现有的数据库中都没有这个基因的序列可查，但是有人的血红蛋白基因数据，因为人和猩猩的亲缘关系比较近，所以你就可以参考人的序列进行引物设计。

第2个回答 2010-04-29

你是想扩基因还是启动子啊？
一般基因的话，你可以用亲缘关系比较近的物种的该基因的序列设计引物，序列可以在NCBI上查到的，如果是启动子，就可以采用接头PCR，或者是设简并
引物来扩，方法很多的

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