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m13引物序列
M13
通用
引物
的设计是针对M13噬菌体的那一段基因?即质粒中有M13的那一...
答:
m13
通用
引物
包括:
M13
forward (-20): GTAAAACGACGGCCAGT M13 forward (-40): GTTTTCCCAGTCACGAC M13 forward (-47): CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC M13 reverse (-24): AACAGCTATGACCATG M13 reverse (-48): AGCGGATAACAATTTCACACAGGA 只要质粒中有与之相对应的
序列
,就可以用来测序 ...
通用测序
引物
的问题,急!谢谢!
答:
您好 这些都是
引物
的型号
M13
+(即M13(-47)), M13-(即M13(-48)), M13(-20),M13(-26),这些什么 (-47)(-48)(-20) 是表示每种的
序列
不同看您需要什么的 序列了 我是北京三博远志测序公司的测序员给你看些序列 M13(-96)5'-CCC TCA TAG TTA GCG TAA CG-3'M13F 5'-TGT AAA A...
T载上连接2000bp的目的片段,请问怎么测序,谢谢!!
答:
一般情况下用T载体上通用
M13引物
,选择双向测序可以达到测通的效果。但是对应的两个末端的结果不太可靠,所以需要人为的选择、拼接一下,当然一些测序公司会根据测序的情况自动给你拼接好。如果不放心,可以直接选择“测通”,公司会在已经测出稳定结果的地方帮你再合成一条引物继续往前测,直到测到载体
序
...
PCR基因扩增原理?
答:
回答:gene amplification 为一特异蛋白质编码的基因的拷贝数选择性地增加而其他基因并未按比例增加的过程。在自然条件下,基因扩增是通过从染色体切除基因的重复
序列
再在质粒中进行染色体外复制或通过将核糖体RNA的全部重复序列生成RNA转录物再转录生成原来DNA分子的额外拷贝而实现的。在实验室已建立了不等交换...
求助通用
引物
验证阳性克隆
答:
做PCR都要考虑Tm值吧。
M13引物
一般是M13F, M13R;M13F(-47), M13R(-48)配对使用。如果做菌落PCR验证阳性克隆的话,如果只是把目的片段插入到多克隆位点处,这两对引物哪一对都可以的。如果是样品需要测序的话,由于接近引物的读出效果不好,如果克隆的位点接近CMS的两端,一般需要用M13F(-47), M13R...
连接转化成功后,用
m13
的
引物
做pcr,跑出好几条带是怎么回事
答:
这种现象我也出现过,我分析的可能是因为
M13引物
自身的特性,如果P长片段,很可能会非特异的与质粒基因组DNA结合或者与质粒结合而产生长度在2000bp左右的条带,会很难验证克隆是否成功。所以,建议用目的片段的特异引物进行PCR反应,或者直接送测序。
pGEM easy-T载体上用的
M13引物序列
是什么?
答:
真想由衷的说一句懒死你,网上到处是,就不自己查。Forward (17mer): 5′-(GTTTTCCCAGTCACGAC)-3′ (2956-2972)Reverse (17mer): 5′-(CAGGAAACAGCTATGAC)-3′ (176-192)
什么叫通用
引物
?都有哪些,如何选择?谢谢!
答:
通用
引物
是一般和载体多克隆位点两旁的
序列
匹配,或者是与载体里面的一些启动、终止元件匹配。这样不管载体插入什么DNA片段,都可以用通用引物扩出来。通用引物可以用来测序,但是只是“通用”,也不是万能的.上海生工可以免费提供的引物:
M13
+(即M13(-47)), M13-(即M13(-48)), M13(-20),M13(-26),...
什么叫通用
引物
,都有哪些?
答:
通用
引物
:一般是指某基因外围保守
序列
.虽然这个基因可能是序列多变的,(如同功酶),但两侧翼序列则是保守的.利用俩侧翼保守序列设计出来的引物,称为通用引物.有
M13
、T7、T3、Sp6
DNA测序仪的试剂器材
答:
本实验测定的质粒dna,浓度为0.2g/l,即200ng/μl。5.引物 需根据所要测定的dna片段设计正向或反向引物,配制成3.2μmol/l,即3.2pmol/μl。如重组质粒中含通用
引物序列
也可用通用引物,如
m13
(-21)引物,t7引物等。6.灭菌去离子水或三蒸水。7.0.2ml或和0.5ml的pcr管 盖体分离,pe...
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