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    • RT-pcr或者qRT-PCR引物设计是用ORF来做模板还是CDs？

    我在NCBI中查到一个基因，他的编码序列只是其中一部分

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    推荐答案   2013-07-02
    qRT-PCR的引物设计使用CDS，最好扩增的片段能包含一个内含子剪切位点，这样可以通过电泳排除扩增基因组DNA的可能性，让定量PCR更准确追问

    那提取出来的总RNA里面为什么有基因组DNA呢？

    追答

    不一定会有，只是为了排除这种可能性，根据提取RNA的方法不同，或多或少会有些基因组DNA污染的，有的提取方法电泳就能看见DNA的条带，有些方法电泳不可见，但仍然有可能能PCR出来的。所以PCR产物跨内含子基本上是定量PCR引物设计的准则之一了

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