请问引物设计是用mRNA和其内部的CDS为模板都可以吗？

Question

构建质粒时候，我想把一个基因连在质粒上，可不知道是用基因的什么序列，mRNA还是CDS，还是这个基因在染色体上的DNA，还有就是添加酶切序列，我是新手，请大侠通俗的解释一下，你应该经常做这方面的内容吧，其他人都是理论家，不是实战家呢

Answer 1

mRNA和CDS的序列是一致的，只不过是RNA和DNA的U和T的区别。
PCR是合成DNA，当然是用CDS了。CDS是编码序列，染色体的DNA是体内转录后剪切才表达，构建质粒的DNA在体外细胞内培养剪切不了。

酶切位点的选择是根据构建质粒所用的载体上的酶切位点，和CDS上的酶切位点决定的。
原则是：1.选择载体上位置相差不少于6个碱基的两个酶切位点，
2.两种酶要有最适缓冲液，
3.两种酶不是同尾酶，即不能切相似的序列，
4.两种酶最好比较常用，这样价格不贵，容易买到，
5.最后也是非常重要的，要选择目的基因即CDS上没有的酶切位点，这个可以在Google搜索Web cutter 2.0这个网页，输入CDS序列，查看CDS上的酶切位点，选择可以使用的酶切位点。追问

大侠阿,CDS序列不时mRNA上面的一部分吗，怎么成了DNA？

追答

CDS是编码序列codingsequence.当然是DNA啦。DNA分为编码链和反向互补的非编码链啊。

追问

不知道你是否做过质粒构建的实验,而不是在理论，；我即将做这个实验，不知道你能否留下个qq,给一些指导

追答

181515726

来自：求助得到的回答