一个物种的cds序列可以用来设计荧光定量PCR的引物吗?求高手指点迷津啊,先谢谢了!!!!

如题所述

可以啊 只要是mRNA上的就可以了 一般扩增产物长度150-200最好追问

mRNA不包括内含子,但是cds是编码区序列,它包括外显子和内含子,我听说设计RT-PCR的引物时不能包括内含子,要跨内含子,这又是怎么回事啊?

追答

cds是mRNA中两端UTR之间的部分。。。。没有内含子

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第1个回答  2012-04-05
如果是用SYBR Green来做。设计的时候要跨外显子的交界区。这样能尽量避免扩增样本中残留的基因组DNA。

转录的时候,外显子和内含子一起被转录,这是序列和基因组DNA一样。剪切后才成为成熟RNA。如果设计引物的时候,至少有一个引物正好跨外显子的交界区。那么只有剪切后的RNA(cDNA)序列才能有效扩增。所以,使用cds序列的时候,先要做一下BLAST,找出交界区,定点设计。
第2个回答  2012-04-04
可以。这就是传说中的qRT-PCR
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