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免疫沉淀
免疫沉淀
(immunoprecipitation)
答:
【答案】:抗原和抗体特异性的结合,变成抗原-抗体复合物。这种复合物往往是不溶解的,常从溶液中
沉淀
出来,这就是
免疫沉淀
反应。抗原是多价的,抗体是二价的,当抗体与抗原等价存在时将发生最大的交联,产生最大量的免疫沉淀。
CHIP:染色质
免疫沉淀
原理与实验步骤
答:
一、CHIP 原理 :活细胞中固定蛋白质-DNA复合物,并用酶切或超声打断的方式将其随机切断为200~1000bp的小片段,然后通过特异的抗体
沉淀
蛋白质-DNA复合物,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。ChIP常应用于研究转录因子(...
免疫
共
沉淀
答:
例如,针对单纯的
免疫沉淀
而非免疫共沉淀实验或者虽然是进行免疫共沉淀实验,但蛋白质之间的结合比较牢靠,可以考虑使用低浓度(0.2-0.5%)的SDS洗涤抗体-agarose beads复合物,这样可以去除绝大部分非特异性相互作用。四、 鉴定 免疫沉淀实验用途非常广泛(见IP: Q&A),而且基于最基本的免疫沉淀实验衍生出了许多免疫沉淀相关...
什么是染色质
免疫
共
沉淀
技术(ChIP)?
答:
染色质
免疫
共
沉淀
技术是在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来的技术。这项技术主要用来分析目标基因有没有活性、或者分析一种已知蛋白(转录因子)的靶基因有哪些。该技术主要应用于以下几方面:1.组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标...
什么是染色质
免疫沉淀
答:
染色质
免疫沉淀
(英语:Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)被用来研究细胞内DNA与蛋白质相互作用,具体来说就是确定特定蛋白(如转录因子)是否结合特定基因组区域(如启动子或其它DNA结合位点)——可能定义顺反组。ChIP还被用来确定基因组上与组蛋白修饰相关的特定位点(即组蛋白修饰酶的靶标)。 此方法...
染色质
免疫沉淀
技术的优缺点?
答:
染色质
免疫沉淀
(ChIP)技术是一种在细胞或组织中检测特定染色质修饰和蛋白-DNA相互作用的方法。它具有以下优点和缺点:1、优点 高特异性:ChIP技术可以针对特定的染色质修饰或蛋白进行检测,具有很高的特异性。保存染色质结构:ChIP技术可以在细胞或组织中保留染色质的原始状态,包括其三维结构和局部环境。...
免疫
共
沉淀
的实验过程
答:
用适量裂解缓冲液洗3 次,每次3,000 rpm离心3 min;(4)将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育2-4h,使抗体与protein A琼脂糖珠耦联;(5)
免疫沉淀
反应后,在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去...
免疫
共
沉淀
实验的原理与过程?
答:
coip实验的原理:Co-IP实验通常依赖于特异性判断,即将目标蛋白质及其交互蛋白带有特定抗体空间上结合,并利用这一结合关系来
沉淀
出其它交互蛋白。
免疫
共沉淀实验过程:1、细胞裂解:首先需要将细胞或组织裂解释放内部蛋白质,使目标蛋白质能够被识别。2、抗体偶联:接着需要将一个已知与目标蛋白质相互作用的...
染色质
免疫沉淀
的目的是什么啊
答:
通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的dna片段沉淀下来。染色质
免疫沉淀
技术一般包括细胞固定,染色质断裂,染色质免疫沉淀,交联反应的逆转,dna的纯化,以及dna的鉴定。摘自柴晶晶博士的文章-染色质免疫沉淀(chip)技术的难点及应用 ...
什么是染色质
免疫沉淀
答:
染色质
免疫沉淀
(英语:Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)用研究细胞内DNA与蛋白质相互作用具体说确定特定蛋白(转录)否结合特定基组区域(启或其DNA结合位点)——能定义顺反组 ChIP用确定基组与组蛋白修饰相关特定位点(即组蛋白修饰酶靶标) 简要程:细胞裂解液蛋白相关染色质暂结合;染色质(DNA)-...
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