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免疫沉淀
【高分急求】
免疫
印迹和免疫共
沉淀
结果图分析
答:
IB每次只能检一种蛋白,所以要检两种蛋白的话,就需要检两次,一次是用是VSV抗体,一次是用标签抗体Flag;IP是共
沉淀
,多种蛋白均是带Flag标签表达的,所以一个Flag可以检出多种蛋白。分清Input和IP,再者就看用什么抗体IP。Input样品中有A和B蛋白,如果用A蛋白的抗体IP,A蛋白可以富集,在IP的样品...
pull-down assay和
免疫
共
沉淀
的区别
答:
都是用来研究蛋白质相互作用的技术
免疫
共
沉淀
的话蛋白质是处于天然状态,蛋白质的相互作用可以在天然状态下进行,可以避免认为影响,还可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体。但是问题是两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;而且必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择...
免疫
磁珠和琼脂糖珠进行免疫共
沉淀
的区别
答:
(5)
免疫沉淀
反应后,在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×SDS 上样缓冲液,沸水煮5分钟;(6)SDS-PAGE,Western blotting或质谱仪分析。注意的问题:(1)细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏...
免疫
共
沉淀
中相结合的两蛋白质是如何分离的
答:
上样时要加loading buffer,煮沸。这时所有蛋白都变性,自然就分开了。也有人先将蛋白洗下来再电泳。
做
免疫
共
沉淀
的时候的洗涤剂一般用什么比较好?
答:
可以先用PBS或TBS洗,这是比较通用的洗涤缓冲液。如果有杂蛋白比较多,需要增加洗涤缓冲液的离子浓度,或者是加入少量的去污剂,为了方便,也有人直接用裂解液洗的。但是如果洗完以后,什么也没有,则要考虑是不是洗涤过度,可能要检测洗涤出来的东西,看看东西丢在哪里了,如果确认就是洗涤的时候丢了,...
抗原抗体
沉淀
反应,凝集反应,补体反应,中和反应,标记
免疫
的抗原抗体反应...
答:
抗体与抗原结合时,如果抗原分子是可溶性蛋白质,这种结合就会使抗原分子失去溶解性而
沉淀
。称抗原抗体沉淀反应。作用是:使抗原分子失去溶解性。抗体与抗原结合时,如果抗原分子是位于细胞上的,这种结合就会使这些细胞凝集成团而失去活动能力。抗原抗体凝集反应。作用是:抗体使与抗原结合的细胞凝集成团地,...
对流
免疫
电泳实验
沉淀
线倾斜原因
答:
样品量不足。通过查看对流
免疫
电泳实验介绍,对流免疫电泳实验是对流免疫电泳是免疫电泳技术中的一种,
沉淀
线倾斜原因是样品量不足。只需增加样品量会保持沉淀线平衡。对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术。
对流
免疫
电泳为什么
沉淀
线是弧形
答:
对流
免疫
电泳
沉淀
线是弧形取决于:抗原抗体的比例:抗原抗体比例适应时容易出现沉淀带,反之不易发生。当抗体浓度恒定时,被检血清含甲胎蛋白浓度高时,作10倍、20倍或更高倍数稀释可以提高阳性率。随稀释度的增加,抗原抗体的比例发生变化,沉淀线由靠近抗血清孔向逐步移向两孔中间,并可出现不典型的...
染色质
免疫
共
沉淀
的技术应用
答:
该技术主要应用于:1.组蛋白修饰酶的抗体作为“生物标记”2.转录调控分析3.药物开发研究4.有丝分裂研究5.DNA损失与凋亡分析
reciprocal coimmunoprecipitation什么意思?什么什么
免疫
共
沉淀
?
答:
用抗体将相应特定分子
沉淀
的同时,与该分子特异性结合的其他分子也会被带着一起沉淀出来的技术。这种技术常用于验证蛋白质之间相互特异性结合。
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