1）利用dna连接酶便可以将目的基因（已经剪切下来的）连接到质粒载体上
2）目的基因的获得：利用限制性内切酶（限制酶）。
这种酶具有专一性...可以识别特定的回文序列来进行剪切。
3）如果你想得到一种基因，有多种方法。
其一：鸟枪法。就是多份样品各添加一种限制酶，然后筛选。
其二：人工合成法。就是利用核苷酸拼接成mrna然后逆转录出相应的基因外显子之后再人工添加内含子就可以了，不过这种方法必须要知道相应的基因序列。
其三：反转录法...。这个同上一个的区别就是——mrna是提取的并不是人工合成的，后面的步骤一样。
二三种方法有一个局限——只能用于真核生物的dna提取。
4）至于细胞因子的基因...你从大肠杆菌中弄出来质粒接上目的基因然后在放回去应该就可以了。
这些问题在中国地图出版社出版的高中生物教材选修三中有比较详细的介绍，你可以弄本来看看。
不要把生物问题放到环境学栏目下了啊~~~呵呵
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