降解的DNA能做PCR吗？

Question

我用酚-氯仿抽提的DNA，经凝胶电泳后发现DNA存在降解的情况，请问这样的标本做PCR的话对结果会有什么影响呢？

Answer 1

PCR扩增原则上对你模板要求不高，因此单纯降解对PCR结果影响不大，除非你做长PCR，或者进行多态分析（如RAPD）。但是你单纯用酚-氯仿抽提，可能会造成DNA里面蛋白、酚、氯仿和其他杂质较多，因此会影响PCR结果。因此建议你进行260/280，230／260分光光度计测定。如果比值异常，建议你对DNA进行纯化，纯化可以采用酒精沉淀方法进行。
目前大多数实验室已经很少用酚－氯仿抽提来进行DNA提取，除非实在是想节约经费。如果经费允许，可以使用试剂盒进行提取，目前国产试剂盒一个样品2-3元，进口约10-15元，效果很好。提取DNA进行PCR没有问题。

Answer 2

有影响的,PCR后的产物就可能和你的目的产物存在差别,如果再转染或者继续下面的实验应该有影响的.
建议找到降解的原因改进.

Answer 3

一般如果做遗传多样性的话，降解的DNA就不要用了
有可能p不出来
如果你做基因的话有可能p出来
不过最好不讲解，想上面说的一样。用试剂盒提
如果不用试剂盒
有纯化的方法
一般只要RNA含量不多是不会影响pcr的

Answer 4

降解很正常，要看你所p的片断大小了，为降解的dna中 由你所需的片断，通过添加引物，仍可p出来

Answer 5

一般PCR对模板的要求不高,降解通常不会有什么大影响的