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尿素是蛋白变形之后如何复性
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第1个回答 2022-12-08
因为尿素使蛋白质变性只是官能团之间的相互结合，并没有使蛋白质失活，因此可以进行恢复。
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何为
蛋白质
的
变性
和
复性
作用
答：
复性作用：在变性条件不剧烈，变性蛋白质内部结构变化不大时，除去变性因素，
在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性
，这种现象称为蛋白质的复性。
蛋白质变性
及
复性
的常用方法
有
哪些
答：
复性：如果变性条件剧烈持久，蛋白质的变性是不可逆的
。如果变性条件不剧烈，这种变性 作用是可逆的，说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时，如果除去变性因素，在适当条 件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性
科学家将煮熟的鸡蛋重新溶解是
怎么
实现的?
答：
这一技术已经不新鲜了，实验室中常用的除了
尿素
还有盐酸胍，它们都
是变性蛋白
较好的溶解剂。在体外表达蛋白时，大肠杆菌由于缺少蛋白折叠辅助因子或者蛋白表达率过高来不及折叠，此时很容易形成非正常折叠的蛋白造成包涵体的出现。常见的纯化方法是将包涵体分离出来用尿素重新溶解包涵体
蛋白后
再
复性蛋白质
。
GSH-GSSG体系在
蛋白质复性
中的作用?
答：
类似的实验还有Anfinsen的核糖核酸酶变性、复性实验，其中复性过程中起着类似作用的是巯基乙醇。实验中
尿素是蛋白质变性
剂，巯基乙醇是巯基还原剂。
蛋白质复性
过程中二硫键的结合不会自然的与原蛋白质中对应的巯基（SH-）对应，因而存在错配现象，在存在微量巯基乙醇的条件下，会保持溶液的还原条件，允许“...
蛋白质复性
答：
出现蛋白析出，肯定是条件变化太剧烈
了
。
复性
应该采取复性液浓度和PH值逐渐变化的方法，例如根据包涵体的溶液成分，每隔1个PH或浓度值配置一种溶液，逐步透析到正常。此外透析时必须浓度极低，条件温和，使
蛋白质
能够正确折叠。但是复性的比率应该很低。若加
变性
剂
尿素
可加到2M，盐酸胍可加到1-1.5M；另外...
蛋白质复性
的冷冻优势
答：
6、
蛋白质
的高压冷结晶复性法：如果把
蛋白复性
仅只理解为肽链在不同
变性
盐溶液浓度中的存在状态。那么蛋白复性就没什么难的，无非是把
尿素
浓度从4M平缓的降低到2M即可。冷结晶析出无疑找到了一条行之有效的途径。但是之前的冷结晶方法似乎有个硬伤，也就是2M尿素时的溶解度，有可能相对的温度在零下——...
蛋白质
的
变性
与变质
有
什么区别?变质或变性的蛋白质是否还具有其原始功...
答：
在β�巯基乙醇和8M
尿素
作用下，发生变性，失去生物学活性，
变性后
如经过透析去除尿素，β�巯基乙醇，并设法使疏基氧化成二硫键，酶蛋白又可恢复其原来的构象，生物学活性也几乎全部恢复，此称变性核糖核酸酶的
复性
。许多
蛋白质变性
时被破坏严重，不能恢复，称为不可逆性变性 ...
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