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稀释复性是蛋白质复性常用的方法,其缺点是什么?应如何解决?
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推荐答案 2022-06-06
1、稀释复性是蛋白质复性常用的方法,其缺点是变性剂稀释速度太快,不易控制。
2、解决办法就是直接加入水或
缓冲液
,放置过夜,然后等待稀释即可。
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包涵体的实验
方法
答:
1、共溶剂:如PEG6000-20000
,据说可以可逆的修饰折叠中间体的疏水集团,此外由于阻止了蛋白质分子间的相互接触的机会,也可能对复性效率的提高起作用。一般的使用浓度在0.1%左右,具体条件可根据实验条件确定。2、二硫键异构酶(PDI)和脯氨酸异构酶(PPI):PDI可以使错配的二硫键打开并重新组合,从而有利于恢复到正常的结...
如何
对包涵体
蛋白
进行表达与
复性
答:
包涵体的复性目前常用的主要有两种方式:1,
稀释溶液,但是操作的液体量大,蛋白稀释;2,透析,超滤或电渗透析去除变性剂
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包涵体
复性
过程有沉淀
是什么
原因
答:
导致其稳定性降低,从而形成沉淀
。解决方法:确保实验过程中的温度、pH 值、溶液成分等条件符合要求,以降低蛋白质变性的风险。2、溶液浓度过高:在复性过程中,溶液浓度过高可能导致蛋白质分子间的相互作用增强,从而形成沉淀。解决方法:根据蛋白质的特性,合理调整溶液中的成分,以保持蛋白质的稳定性。
什么
叫
蛋白质的复性
答:
复性
:是指变性的
蛋白质
在使它变性的理化条件恢复正常后,它的结构和功能可以部分恢复(部分恢复哦)的性质。呼吸链:呼吸链是电子传递链。它定位于线粒体内膜由一组排列有序的H+和电子递体(酶与辅酶)构成的功能单位。呼吸链在线粒体内膜上可能以四个复合物形式存在。复合物Ⅰ是NADH——泛醌(UQ)...
蛋白质
变性及
复性的常用方法
有哪些
答:
很容易引 起分子间相互碰撞而聚集沉淀。复性:如果变性条件剧烈持久,蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性 作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时,如果除去变性因素,在适当条 件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性,这种现象称
为蛋白质的复性
...
蛋白质复性的
实际应用有哪些?
答:
免疫诊断:
蛋白质复性
技术可用于免疫诊断试剂盒的制备。在免疫检测中,变性抗原常常导致抗体结合位点的丧失,从而影响检测结果的准确性。通过复性技术,可以使变性抗原重新恢复到其正常的三维结构和功能,提高免疫诊断试剂盒的灵敏度和特异性。蛋白质结构研究:蛋白质复性过程中的结构变化可以
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