血吸虫的诊断

如题所述

牛血吸虫病有两种,一是由日本血吸虫引起的日本血吸虫病,毛蚴的中间宿主是钉螺,多见于长江流域及南方省区。二是由鸟毕吸虫引起的鸟毕吸虫病,主见于东北、内蒙古地区。两种都是人畜共患病。以3岁以下的小牛发病率最高,症状最重。临床上病牛呈不规则的间歇热,后期腹泻,甚至大便失禁。实验室常对可疑病牛以水洗沉淀法进行虫卵检查。日本血吸虫卵为椭圆形,内含毛蚴。鸟毕血吸虫卵呈长椭圆形,内含毛蚴,虫卵两端有大小不同的突起。也可进行毛蚴孵化检查,其方法为取牛粪适量,经水洗得粪渣倒入三角烧瓶内,加温水孵化(以22~26℃)1、3、5小时后各观察1次,在光线明亮处,衬以黑色背景可见尾蚴是水平或斜向直线运动。有条件的还可采取环卵沉淀反应,补体结合反应或皮内试验、间接血凝、免疫电泳等辅助诊断。
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第1个回答  2016-05-10

血吸虫病的诊断包括病原诊断和免疫诊断两大部分,具体方法详见附录。 从粪便内检查虫卵或孵化毛蚴以及直肠粘膜活体组织检查虫卵。
⑴直接涂片法:重感染地区病人粪便或急性血吸虫病人的粘液血便中常可检查到血吸虫虫卵,方法简便,使虫卵检出率低。
⑵毛蚴孵化法:详见附录。可以提高阳性检出率。在现场进行大规模粪便检查时,为了提高功效,产生了许多改良方法,如尼龙袋集卵法,可缩短集卵时间,降低损耗,便于流动性普查;为了便于观察毛蚴,可采用塑料杯顶管孵化法,毛蚴集中,便于观察,检出率较高。为了提高粪便检查效果,常常需要连续送检粪便3次。
⑶定量透明法:用作血吸虫虫卵计数。常用的计算方法为kato厚片法。可测定人群感染情况,并可考核防治效果。
⑷直肠粘膜活体组织检查:慢性及晚期血吸虫病人肠壁组织增厚,虫卵排出受阻,故粪便中不易查获虫卵,可应用直肠镜检查。血吸虫病人肠粘膜内沉积的虫卵,其中有活卵、变性卵和死卵。对未治疗病人检出的虫卵,不论死活均有参考价值;对有治疗史病人,如有活卵或近期变性卵,表明受检者体内有成虫寄生。若为远期变性卵或死卵,则提示受检者曾经有过血吸虫感染。目前流行区血吸虫病人大多已经过一次或多次治疗,检查到活卵的病例很少,并且此方法有一定的危险性,故不适于大规模应用。 ⑴皮内试验(intradermal test,idt):一般皮内试验与粪检虫卵阳性的符合率为90%左右,但可出现假阳性或假阴性反应,与其他吸虫病可产生较高的交叉反应;并且病人治愈后多年仍可为阳性反应。此法简便、快速、通常用于现场筛选可疑病例。
⑵检测抗体:血吸病人血清中存在特异性抗体,包括igm、igg、ige等,如受检者未经病原治疗,而特异性抗体呈阳性反应,对于确定诊断意义较大;如已经病原治疗,特异性抗体阳性,并不能确定受检者体内仍有成虫寄生,因治愈后,特异性抗体在体内仍可维持较长时间。目前检测抗体的血吸虫病血清学诊断方法很多,常用的有以下几种(详见附录)。
1)环卵沉淀试验(circunoval precipitin test,copt):通常检查100个虫卵,阳性反应虫卵数(环沉率)等于或 大于5%时,即为阳性。粪检血吸虫卵阳性者,copt阳性率平均为97.3%(94.1%~100%)。健康人假阳性率为3.1%,与肺吸虫病、华支睾吸虫病可出现交叉反应。患者有效治疗后copt阴转较慢。若血吸虫病人距末次治疗时间已3~5年,而copt环沉率为3%或3%以上者,可结合临床表现考虑给予重复治疗。目前在基本消灭血吸虫病地区,已广泛应用copt作为综合查病方法之一。为了操作规范化、标准化,并适合于现场应用,对copt方法作了许多改良,如塑料管法,双面胶纸法等。
2)间接红细胞凝集试验(indirect haemagglutination test,iha):粪检血吸虫虫卵阳性者与iha阳性符合率为92.3%~100%,正常人假阳性率在2%左右,与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫感染者可出现假阳性反应。iha操作简便,用血量少,判读结果快,目前国内已广泛应用。
3)酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,elisa):此试验具有较高的敏感性和特异性,并且可反应抗体水平,阳性检出率在95%~100%,假阳性率为2.6%,病人在吡喹酮治疗后半年至一年有50%至70%转为阴性。此试验已应用于我国一些血吸虫病流行区的查病工作。近年来,在载体、底物及抗原的纯化方面都作了改良,如快速-elisa,硫酸铵沉淀抗原-elisa等。
4)免疫酶染色试验(immunoenzymic staining test,iest):见附录。
在检测血吸虫特异抗体的方法中,尚有许多种,如间接荧光抗体试验(ifat)、胶乳凝集试验(la)、酶标记抗原对流免疫电泳(elacie)等,这些方法有它们各自的优点。
值得提出,近年来随着科技的发展,某些高科技和新方法被逐步引用到血吸虫病的诊断和研究领域。例如免疫印渍技术(immunoblotting)又称(western blot),是在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定的基础上建立的一种具有分子水平的免疫学新技术,有力推动了血吸虫病血清学诊断方法的进展,它不但能对血吸虫抗原的限定组分蛋白进行分析和鉴定,而且能用以诊断病人和区分血吸虫病不同病期的新型血清学诊断方法。又如杂交瘤技术制备单克隆抗体(mcab)的应用。采用特异的mcab纯化血吸虫抗原,用于血吸虫病血清学诊断;也可应用mcab检测循环抗原,为血吸虫病诊断提供新的途径。
⑶检测循环抗原:由于治疗后抗体在宿主体内存留较长时间,其阳性结果往往不能区分现症感染和既往感染,也不易于评价疗效。循环抗原是生活虫体排放至宿体内的大分子微粒,主要是虫体排泄、分泌或表皮脱落物中具有抗原特性,又可为血清免疫学试验所检出。从理论上讲,cag的检测有其自身的优越性,它不仅能反映活动性感染,而且可以评价疗效和估计虫荷。
在感染血吸虫宿主体内cag的种类较多,目前可检出比较重要的3类游离循环抗原,即肠相关抗原(gaa)、膜相关抗原(maa)和可溶性虫卵抗原(sea)。在检测方法上,采用检测不同靶cag的探针,包括抗血吸虫抗原不同表位──单克隆抗体、组合单克隆抗体以及多克隆抗体等。在检测的具体方法有:斑点elisa(dot-elisa),双抗体夹心elisa等。近年来,国内、外学者对cag进行了多方面的研究、进展很快,并已取得了不少可供参考的结果。但是,要过渡到临床实用阶段仍有许多问题和影响因素急待探讨与解决,如当前检测的方法有待改进和规范化;免疫复合物的形成和抗独特型抗体存在对检测结果的影响;循环抗原在感染宿主体内消长规律及治疗后的转归等。
⑷综合查病:上述各种检查方法各有优缺点,如果将几种方法合理搭配,由简到繁,综合查病,则可收到事半功倍的效果。一般在重流行区,粪检尚能查出一定比例病人的地方,仍以粪检为主,辅以其他方法检查;而在基本消灭血吸虫病地区,则应以免疫诊断为主,取得多项数据,综合判断。

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