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DNA提取的具体过程
如题所述
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推荐答案 2019-10-03
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%
٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.(一般学校实验室较为简单的教学就用这个方法)
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dna提取
基本步骤
答:
3、通过添加蛋白酶消化蛋白质。4、通过添加RNase
,消化RNA。5、通过加入浓盐然后离心分离细胞碎片、消化蛋白质、脂质和 RNA。6、用冰冷的乙醇或异丙醇乙醇沉淀 DNA。 醋酸钠的离子强度可用于改善沉淀。 沉淀的 DNA 在最终溶液中呈线状。二、dna提取释义:DNA提取是DNA的分离和纯化过程。DNA可以从血液、...
DNA
抽提方法与步骤
答:
在
提取过程
中为抑制组织中的DNase对
DNA 的
降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,
提取DNA
. (2).阴离子去污剂法; 用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配...
DNA提取过程
中的关键步骤及注意事项有哪些
答:
DNA提取的
完整步骤 :1. 取新鲜或冷冻样品的肌肉组织100ul-200ul或95%ALC保存的样品组织0.05g。 2. 将组织尽量剪碎,分别装入1.5ml 的离心管中。3. 每管中加入450ul的裂解缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.0; 100mM EDTA, pH8.0)4. 每管加入10% SDS 50-100ul(70-80不定) (1-2%),再...
dna提取
实验步骤是什么?
答:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中
,离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出。分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品。此法提取的DNA中蛋白质...
DNA提取的
步骤及原理
答:
答:蛋白质对
DNA
制品的污染常常影响到以后的DNA操作
过程
,因此需要把蛋白质除去。一般采用苯酚/氯仿抽提的方法。苯酚、氯仿对蛋白质有极强的变性作用,而对DNA无影响。经苯酚/氯仿抽提后,蛋白质变性而被离心沉降到酚相与水相的界面,DNA则留在水相。取ACD抗凝血2~3ml,置于15ml的离心管内---加灭菌生理...
DNA提取过程
中的关键步骤及注意事项有哪些
答:
②鉴定 取4 mL
DNA提取
液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100 ℃)加热10 min 。在加热
过程
中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。研磨液的配制方法 Tris:10.1 g(相对分子质量为121.14),先加50 mL 蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 moL/L...
提取DNA的
方法总结
答:
分子热运动也会减少所抽提到的
DNA
分子量,所以
提取过程
也要尽可能在低温下进行。另外细胞内及抽提器皿中污染的核酸酶也会降解制备过程中的DNA,所以制备过程要抑制其核酸酶的活性。另外制备的细菌染色体DNA 必须是高纯度的,以满足基因工程中各种酶反应的需要,制备的样品必须没有蛋白污染,没有RNA,各种...
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DNA提取的普遍过程
基因组DNA的提取
怎样避免提取的DNA降解
基因组DNA提取纯化的原理
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