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基因组DNA提取纯化的原理
基因组dna提取的原理
答:
(1)
螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基)
;(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。2.溶液II-NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pH<3时,就会引起...
DNA提取的
步骤及
原理
答:
酚-氯仿法
提取
人外周血
基因组DNA
的基本
原理是什么
?答:蛋白质对DNA制品的污染常常影响到以后的DNA操作过程,因此需要把蛋白质除去。一般采用苯酚/氯仿抽提的方法。苯酚、氯仿对蛋白质有极强的变性作用,而对DNA无影响。经苯酚/氯仿抽提后,蛋白质变性而被离心沉降到酚相与水相的界面,DNA则留在水相。取...
细胞/组织
基因组DNA提取
试剂盒(离心柱型)洗脱纯净基因组DNA的工作原 ...
答:
博凌科为 细胞/组织
基因组DNA提取
试剂盒(离心柱型)洗脱纯净基因组DNA的工作
原理
及步骤:独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最...
在实验
基因组DNA
的分离
纯化
中如何保证DNA的完整性
答:
RNA 的去除,首先是使用 RNase 消化。在溶液 I 中加入高浓度的 RNase A ,或者用含 25ug RNase A/ml TE 溶解抽提好的质粒,都可以降低 RNA 残留,但都不能彻底去除。如果想彻底去除 RNA 残留,可以用试剂盒,或者使用对 4 个碱基都作用的 RNase。4、洗脱时60℃温育(Ellution Buffer)洗脱缓冲...
如何研磨小鼠器官成粉末,提
基因组
用
答:
基因组DNA提取原理
及方法 一、原理 DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离酸易溶于水,RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L。DNA在水中为10g/L,呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中,DNA天然状态的DNA 是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。要从...
全血
基因组DNA提取
试剂盒的作用
原理
是怎样的
答:
全血
基因组DNA提取
试剂盒(离心柱型)作用原来具体是这样的:独特的结合液,蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜。再通过一系列快速的漂洗,离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净...
简述CTAB法
提取
植物
基因组
总
DNA的原理
答:
原理
CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵 ),是一种阳离子 去污剂 ,具有从低 离子强度 溶液中沉淀核酸与酸性 多聚糖 的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂 抽提 ,去除蛋白,多糖,酚类等杂质...
细菌
基因组的提取原理
答:
一、实验
原理
真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备
基因组 DNA
。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。
提取DNA
的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中...
磁珠法
提取基因组DNA的原理
是什么?
答:
(a)磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂,可使动植物的细胞裂解,并使与
DNA
结合的蛋白质变性,DNA游离释放,磁球可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,再因洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA,得到纯度和浓度均很高的DNA,可用于PCR扩增、酶切、分子杂交等。(b)生物磁珠是一种...
简述CTAB法
提取
植物
基因组
总
DNA的原理
答:
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;(2)加入800 μl的CTAB
提取
缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000 r/min,离心15 min;(3)小心吸取上清液,加入等体积的酚:氯仿(各400μl)溶液,混匀,4℃,12000 r/min,离心10 min;...
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