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慢病毒稳定
什么是
慢病毒
、腺病毒及腺相关病毒,他们在科研领域的主要应用和特点分别...
答:
慢病毒
:① 可以
稳定
整合至宿主基因组,整合位点随机;② 可以对分裂期及非分裂期细胞进行感染;③ 包装片段至多8 kb,浓缩滴度至多为108-109TU/mL,片段越大,滴度越低;④ 可以应用Tet-on等诱导表达系统,表达水平较高;腺病毒:① 不能整合至宿主基因组,仅能瞬时表达;② 可以对分裂期...
慢病毒
与腺病毒的比较
答:
2)可以通过简单方式,在短时间内获得
稳定
表达特定基因的多种细胞株。3)可用于基因敲除、基因治疗和转基因动物研究。4) 无需任何转染试剂 ,操作简便。5)可以根据客户需要制备多种标记。1.1.3
慢病毒
包装简要流程:1)含有目的基因的慢病毒RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化提取。2)慢病毒载体,...
如何利用
慢病毒
载体构建
稳定
表达外源基因的细胞系
答:
1.将外源基因插入
慢病毒
载体 2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞 3.收集病毒液 4.用病毒液感染靶细胞 5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法 6.获得稳转株 具体可以参考该文献:《c-Met基因siRNA慢病毒表达载体的构建及其
稳定
转染细胞》
细胞转染
慢病毒
好还是腺病毒好
答:
慢病毒
较好些,要看你做什么实验了。1.转染效率:慢病毒较高 2.慢病毒可以实现
稳定
转染,腺病毒是瞬时转染 3.包装量:慢病毒可以包装4kb左右,不超过8kb的外源基因,腺病毒可以包装8kb左右外源基因 4.慢病毒操作较方便,周期也短。但腺病毒表达快,1-2天,慢病毒要2-4天。5.安全性:两个差不多...
病毒包装-
慢病毒
答:
!在程序上,
慢病毒
和逆转录病毒载体的一个重要区别在于:对慢病毒载体,通常包装、包膜和转运质粒共转染入包装细胞系,而对逆转录病毒载体,只有转运载体才转染到细胞系内,而细胞系早已
稳定
表达另外两种载体.包膜蛋白 病毒载体可以借助其他病原体的外壳蛋白包装成假病毒,以改变其嗜性。最常用的是疱疹性...
求助
慢病毒
侵染,puromycin筛选
稳定
knockdown细胞系问题
答:
1.将外源基因插入
慢病毒
载体 2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞 3.收集病毒液 4.用病毒液感染靶细胞 5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法 6.获得稳转株
慢病毒
包装的原理
答:
病毒包装的原理,就是有遗传物质有外壳蛋白,在细胞内可以指导二者包成病毒。腺病毒扩增,也只能在293A里扩增,其他的细胞不行.
慢病毒
载体多是由HIV改造的,野生型的慢病毒载体是可以复制的,但是用于实验室就只能通过改造使其变为复制缺陷型的。简单来说,就是把相应的涉及相应功能的元件进行替换或者...
真核表达载体、腺病毒载体、
慢病毒
载体在使用上的区别是什么?_百度...
答:
真核表达载体包括腺病毒载体和
慢病毒
载体,在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。腺病毒载体携带外源基因较大,可瞬时高表达。慢病毒载体携带外源基因较小些,但可以重组入细胞基因组,
稳定
高表达。
过表达和干扰的空载体可以是一个吗
答:
需要有筛选基因的表达来选出整合的细胞,现在都是通过
慢病毒
来实现本质上是一样的,只要有强的启动子就可以了,都是让外源性的基因序列在细胞内得到表达。
稳定
表达的。而干扰质粒一般都需要是稳定的表达,技术细节上也会有不同。但是由于目的不同。过表达的质粒如果是一过性表达,不需要整合到细胞染色体...
转染试验,都可以转染哪些分子
答:
瞬时和稳转是针对于DNA是否整合到染色体上说的,整合到染色体上问题遗传表达就是稳转,否则就是瞬时的,一般认为电转,和脂质体、显微注射是瞬时转染,
慢病毒
、腺病毒等是稳转,但这并不准确,整合有特异的和非特异的,有整合因子电转的脂质体的也可以稳转,慢病毒这些稳转也是有一个效率的问题,稳转关键...
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