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蛋白质辅助复性的方式
蛋白质复性的
分子伴侣
辅助蛋白质
答:
Teshima等利用固定化分子伴侣,在体外辅助了淀粉酶、碳酸酐酶、DNA酶的折叠复性
[14]。还有报道利用“小分子伴侣”对目标蛋白质进行复性[15、16]。“小分子伴侣”是指GroEL的一个片段,而这个片段并不是GroEL的水解产物,而是由基因重组后包括GroEL191-345氨基酸残基片段(16.7kD)或191-376氨基酸残基片段(2...
蛋白质复性的
复性研究
答:
发现直链糊精基本上能够模拟环糊精在辅助蛋白质复性方面的作用
,而且具有这样一些优点:直链糊精的螺旋结构形成一个疏水性空管,可以结合更多的蛋白质分子;在水中溶解度较高,有利于提高复性酶浓度和实验操作;价格比环糊精便宜,
如何对包涵体
蛋白
进行表达与
复性
答:
包涵体的复性目前常用的主要有两种方式:1,
稀释溶液,但是操作的液体量大,蛋白稀释;2,透析,超滤或电渗透析去除变性剂
。1.包涵体的稀释复性 设定不同的复性条件:蛋白质量浓度、尿素浓度、温度、氧化还原条件、加入Ttiton X-100与环糊精的量、复性时间等,使变性溶解的包涵体稀释复性,复性一定时间后取...
蛋白质
变性及
复性的
常用方法有哪些
答:
引起
蛋白质
变性的因素很多,物理因素有高温、紫外线、X-射线、超声波、高压、剧烈的搅 拌、震荡等。化学因素有强酸、强碱、尿素、胍盐、去污剂、重金属盐(如 Hg2+、Ag+、Pb2+ 等)三氯乙酸,浓乙醇等。不同蛋白质对各种因素的敏感程度不同。 蛋白质变性后许多性质都发生了改变,主要有以下几个方...
什么叫
蛋白质的复性
答:
复性:是指变性的蛋白质在使它变性的理化条件恢复正常后,它的结构和功能可以部分恢复(部分恢复哦)的性质
。呼吸链:呼吸链是电子传递链。它定位于线粒体内膜由一组排列有序的H+和电子递体(酶与辅酶)构成的功能单位。呼吸链在线粒体内膜上可能以四个复合物形式存在。复合物Ⅰ是NADH——泛醌(UQ)...
蛋白质复性的
初期成果
答:
5];Hagen等利用反胶团萃取人工变性的
蛋白质
后去除变性剂进行
复性
,复性率可达100%[6](但由于变性剂的存在,萃取率很低);Batas等利用凝胶过滤色谱介质的分子筛作用可防止变性蛋白质间的接触和凝聚,
辅助
其正确折叠[7];Zardeneta等利用去污剂及混合胶团,成功地辅助了脲变性硫氰酸酶复性[8]。
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蛋白
变性后如何
复性
答:
对于
蛋白质
变性过后是没有办法复性,只有蛋白质的活性被抑制(如低温)才能
复性的
何为
蛋白质的
变性和
复性
作用
答:
强碱、重金属盐、尿素、丙酮等;能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。复性作用:在变性条件不剧烈,变性蛋白质内部结构变化不大时,除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性,这种现象称为
蛋白质的复性
。
蛋白质复性的
折叠机制
答:
在折叠反应中,从伸展态到中间体的形成是非常快速的,一般在毫秒范围内完成,但从中间体转变为天然态的过程比较缓慢,是反应的限速步骤。当溶液中离子强度或变性剂浓度很低,又无其它
辅助
手段存在时,聚集趋势占主导地位,导致
蛋白质的
自发
复性
效率极低。一般认为,蛋白质在复性过程中,涉及两种疏水相互作用...
蛋白质
在体外或细胞内
复性
或折叠的机制是什么
答:
▲扩散-碰撞-粘合机制 (Diffusion-Collision-Adhesion Model) 该模型认为
蛋白质
的折叠起始于伸展肽链上的几个位点,在这些位点上生成不稳定的二级结构单元或者疏水簇,主要依靠局部序列的进程或中程(3-4个残基)相互作用来维系.它们以非特异性布朗运动
的方式
扩散、碰撞、相互黏附,导致大的结构生成并因此而...
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