慢病毒包装的简要流程

Question

如题所述

Answer 1

慢病毒包装简要流程：

1）含有目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。

2）慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。

3）培养48hrs-72hrs左右，收集含有病毒的上清培养液。

4）病毒的纯化和浓缩。

5）分装、-80℃保存。

6）滴度测定目的基因鉴定。

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Answer 2

慢病毒包装是将目的基因表达载体、包膜质粒、包装质粒共转染293T细胞，在细胞内进行病毒的包装，继而收集病毒上清，经浓缩、纯化、滴度测定、质检后得到所需慢病毒，可用于感染靶细胞。
通过包膜蛋白与细胞表面受体结合的方式感染细胞，即慢病毒与宿主细胞膜融合后释放结构蛋白、酶蛋白和RNA。RNA在逆转录酶的作用下逆转录并与整合酶形成整合前复合物。整合前复合物进入细胞核后，可以将病毒基因有效地整合到宿主染色体上，达到持久性表达。