如何制作小鼠骨髓细胞的标本?

如题所述

在制备小鼠骨髓细胞染色体标本过程中以下几个步骤需要注意:

    提前3-4小时候注射秋水仙素,时间太长或者太短都会影响染色体中期的数目和形态。

    在低渗过程中时间和吹打都很重要,低渗过度染色体膨胀,染色后肥肥的,低渗时间不过染色后染色体颜色很深看不出条带。

    滴片,如果是教学的实验,要求玻片是冰的,而且要倾斜,滴的高度一般在25-30CM,滴完要过酒精灯,让固定液蒸发。滴的数量不要太多否则会重叠.如果是医院里的染色体制片有专门的滴片机。

小鼠骨髓细胞染色体标本制作:

    原理:

    由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析;

    试剂、试剂盒:秋水仙素、姬姆萨染液、固定液、低渗液、生理盐水;

    仪器、耗材:天平、离心机、恒温培养箱、显微镜;

    实验步骤

    一、材料和方法

    1.  材料:小白鼠。

    2.  设备:天平,离心机,恒温培养箱,显微镜。

    3.  药品:秋水仙素,姬姆萨染液,固定液,低渗液,生理盐水。

    二、步骤

    秋水仙素处理--取骨髓--低渗处理--固定--离心--再固定--再离心--滴片--染色--镜检--封片。

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