第1个回答 2010-12-04
牛血清白蛋白的提取与鉴定
[样品] 小牛血清
[操作]
盐析：
取小 牛血清0.5毫升+PBS液0.5毫升+饱和硫酸铵2.3毫升，充分混匀，静止20分钟，2500转/分离心10分钟。
透析：
取玻璃纸一张，折成袋形，将离心后的上清液倒入袋内，用线扎紧上口（注意要留有空隙），放入装有自来水的小烧杯中透析，要不断振动，每隔2分钟换一次水，共换水15次。
电泳：
1）点样
用两支毛细管分别将标准液及测定液点在同一张醋酸纤维素薄膜的无光泽面上（划好点样线并作好标记），标准液点一次，测定液点三次。
2）电泳
将点样后的膜条置于电泳槽架上，放置时无光泽面向下，点样端置于阴极，平衡5分钟，开电源160伏60分钟，关闭电源后用镊子将膜条取出。
3）染色
将膜条直接浸于盛有氨基黑10B的染料中，染2分钟取出，立即浸于漂洗液中，分别在漂洗液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各漂洗5分钟，直至背景漂洗干净为止。
4．观察结果