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荧光定量pcr中溶解曲线的温度大概是多少
如题所述
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推荐答案 推荐于2018-04-06
一般
染料
法定量pcr在进行完pcr后都要运行
熔解曲线
,一般设定先94度几分钟,然后骤冷到65度(假定65度为退伙温度).在65度时,pcr产物是以双链的形式存在的。
因为染料是插到双链dna的小沟里然后发荧光的,所以这个时候检测到很强的光信号,随着温度升高,双链逐渐打开,荧光信号逐渐减弱。
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第1个回答 2019-03-26
Realtime PCR的溶解曲线的出峰温度一般在85度——90度,溶解温度是指核酸片段解链一半时的温度。哪些因素影响熔解温度呢?PCR产物大小,GC含量等,一般的熔解温度是要大于80度的。我们实验室用BIOGHC -PCR检测了DNA,溶解曲线是为了验证扩增产物特异性的
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