如何从血液中提取mirna

Question

如题所述

Answer 1

全血提取我用过百泰克的，提取的效果比较好，最终纯度也还不错。大概1ml全血最多能提出来8ug吧，已经比一般传统方法3~7ug要好的多。

血清血浆就推荐QIAgen的试剂盒217004，小量提取试剂盒，每个纯化柱只能提200ul，最终出来的量一般是150ng~300ng（正常人的都很少，有炎症或癌变人的血清血浆miRNA会更多）。

另外，这样出来的都是total RNA，只不过是其中保留下了小分子的miRNA，如果要分离miRNA，还需要别的手段，例如PEG分离法，专门试剂盒分离。实际实验中，很多都只需要total RNA起始即可。

Answer 2

采集抗凝外周静脉血5mL，在常温下2 h内进行处理．血标本在4℃下1 200 离心10 min，转移上层血浆至5mL管 ，然后在4℃下12 000 g离心10 min去除细胞成分．转移血浆至新的5 mL管，-80℃保存以各miRNA抽提．血浆miRNAs抽提：每份血浆标本取200-300 uL加入50pmol／L的内参细胞液，然后加入20 L 5 mol／L的醋酸和750 uL的目的试剂盒中的溶液．RNA抽提按其操作步骤进行，抽得的RNA用50 uL的无核酸酶水溶解后．80℃保存．

Answer 3

目前有很多的方法进行，包括有市面上各个公司销售的提取试剂盒，也可进行传统的trizol提取方法。
同时也要分清是提取全血，还是提取血清或血浆中的miRNA