我要对脂肪酸标准品进行甲酯化后再气相色谱测定,遇到的问题是:要配成一定的浓度(1mg/ml),怎么计算?

参考的甲酯化方法如下:“总脂用10mL甲醇溶解后转移至分液漏斗中,用15mL正己烷分三次洗涤,所得甲醇溶液转移到大试管中,加入4mLp(KOH)=1%KOH的甲醇溶液,60℃水浴加热15min,冷却后加入5滴p(BF3)=20%的BF3乙醚溶液,静置l0min酯化。酯化后的样品加入5mL的重蒸正己烷和10ml水,分去水溶液,有机层用10mL水洗涤。取2.0ml的有机层加入一定量的硅胶,不振荡静置2.0min。取20.0uL的有机层加入到含有1.0mL正己烷的具塞试管中备用,作为进行气相色谱分析的样品。”这个方法是否可行?可行的话,我要称取多少脂肪酸标准品的量进行?上面方法中的试剂的量是否合适?最后取20ul有机层用1ml正己烷定容,这是不是就是最后脂肪酸甲酯化后的浓度?怎么计算他的浓度是多少?拜托,帮忙一下,第一次做色谱,自己老师也不懂!!!

第1个回答  2011-03-28
据分析,1ml应是正己烷。从提供的方法看是用BF3进行脂肪酸甲脂化的操作步骤,到加入硅胶除去水后已完成甲脂化。最后是将脂肪酸甲脂用正己烷稀释以便气相分析。一般气相进样量在10ul左右,但进样前一般要用样品溶液洗针2-3次,故进行一次分析需要的样品量大于20ul。且体积太小也不便于准确进样。此外,气相分析所需脂肪酸甲脂浓度较低。综合以上,分析其可能为正己烷。
以上均为猜测,仅供参考,建议还是去请教你的老师。追问

抄人家的也不必这样吧 没看见问题不一样啊

第2个回答  2011-04-06
楼主最终测定的应该是脂肪酸的含量 不是脂肪酸甲酯的含量呀
定量的话以脂肪酸标准品定量就行了!!

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第3个回答  2011-04-09
我们一般是买标准样品,国家标准物质中心的。
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