荧光分光光度计测试荧光强度与哪些条件有关

如题所述

待测物质方面
1.含共轭π键体系,体系越大荧光越强
2.刚性平面构型,刚性平面越大,荧光强度越大
3.取代基的影响,给电子取代基加强,吸电子取代基减弱
4.最低电子激发单重态性质,π-π*跃迁比n-π*跃迁产生更强的荧光
环境方面
1.溶剂,溶剂弛豫造成吸收发射间的能极差,溶剂的极性增大会使荧光光谱发生红移,氢键也有一定影响
2.介质酸碱性,视待测物的酸碱性与结构而定
3.介质的温度和黏度,温度越高强度越小,黏度越大强度越大
4.有序介质(如表面活性剂)的影响,有序介质的存在会使强度增大
经供参考

参考资料:分析化学,武汉大学第五版

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第1个回答  2011-05-21
1)激发光谱

改变激发波长,测量在最强荧光发射波长处的强度变化,以激发波长对荧光强度作图可得到激发光谱。

激发光谱形状与吸收光谱形状完全相似,经校正后二者完全相同!这是因为分子吸收光能的过程就是分子的激发过程。

激发光谱可用于鉴别荧光物质;在定量时,用于选择最适宜的激发波长。

2)发射光谱

发射光谱即荧光光谱。一定波长和强度的激发波长辐照荧光物质,产生不同波长的强度的荧光,以荧光强度对其波长作图可得荧光发射光谱。

由于不同物质具不同的特征发射峰,因而使用荧光发射光谱可用于鉴别荧光物质。
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