反相高效液相色谱的固定相是什么,流动相有什么什么?

如题所述

反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。

反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。

RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,典型的流动相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式,几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。 反相色谱法适于分离非极性、极性或离子型化合物,大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。

扩展资料

反相高效液相色谱的原理:

在反相键合相色谱法中使用的是非极性键合固定相。它是将全多孔(或薄壳)微粒硅胶载体,经酸活化处理后与含轻基链(c4、C8、C18)或苯基的硅烷化试剂反应,生成表面具有烷基或苯基的非极性固定相。如共价结合到载体上的直链碳氢化合物正辛基等。

关于反相色谱的分离机理,吸附色谱的作用机制认为溶质在固定相上的保留主要是疏水作用,在高效液相色谱中又被称为疏溶剂作用。根据疏溶剂理论,当溶质分子进入极性流动相后,即占据流动相中相应的空间,而排挤一部分溶剂分子。

当溶质分子被流动相推动与固定相接触时,溶质分子的非极性部分或非极性因子会将非极性固定相上附着的溶剂膜排挤开,而直接与非极性固定相上的烷基官能团相结合(吸附)形成缔合络合物,构成单分子吸附层。

这种疏溶剂的吸附作用是可逆的,当流动相极性减少时,这种疏溶剂斥力下降,会发生解缔,并将溶质分子解放而被洗脱下来。

参考资料来源:百度百科-反相高效液相色谱

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第1个回答  2011-06-01
转载:《分析测试百科网》
 什么叫反相色谱?试从固定相、流动相、流出次序、流动相极性的影响等几个方面比较正相和反相的区别。

  解:流动相的极性比固定相的极性强的色谱体系叫反相色谱。例如以十八烷基硅胶键合相(ODS)为固定相,以甲酵/水作流动相,是典型的反相色谱。正相色谱和反相色谱这两种操作模式的主要区别见下表:

  正相和反相色谱的区别

  比较项目正相色谱反相色谱

  固定相

  流动相

  流出次序

  流动相极性的影响极性

  非(弱)极性

  极性组分k大

  极性增加,k减小非(弱)极性

  极性

  极性组分k小

  极性增加,k增大

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第2个回答  推荐于2018-09-25
反相即指流动相极性比固定相大的液相色谱法
同一根柱子,可能是正相,也可能是反相,例如安捷伦 ZORBAX CN柱,用正己烷-异丙醇作流动相就是正相HPLC,用水-甲醇/乙腈就是反相HPLC
固定相一般是非极性的,如十八硅烷C18本回答被提问者和网友采纳
第3个回答  2011-05-27
反相即指流动相极性比固定相大的液相色谱法
反相中最常用的是C18柱,最常用的流动相是乙腈,甲醇和水,可以添加一些其他东西,如磷酸盐,酸或胺类,也可以加活性剂等,看分析需要
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