启动子是质粒上的还是插入的目的片段上的呢？如果是目的片段上，那插入的片段较小，不具备启动子，那怎么判断呢？是必须要知道启动子吗？
追答呃 启动子是质粒上面必备的元件，如果没有启动子，插入的基因是无法表达的。你的起始密码子也得接在启动子后面，这样就是正向插入，如果后面接的是终止密码子，是反向插入，无法表达的
追问如果我不做表达，只是想把目的片段连上去，去做灵敏度啊重复性一类的实验，是正向插入还是方向插入都没关系吧？
追答你如果不需要基因行使功能的话可以不考虑目的片段的方向的，你比如说我只是要得到纯化的插入片段，我不知道你说的灵敏度、重复性是什么实验，无关基因功能，一般也就不需要考虑其方向的