高效液相色谱仪的流动相选择原则是什么?

如题所述

效液相色谱法对流动相的要求如下:

1、选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性。

2、选用的溶剂应有高纯度,以防所含微量杂质在柱中积累,引起柱性能的改变。

3、选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如果使用紫外吸收检测器,就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂;若使用视差折光检测器,就不能用梯度洗脱。

4、选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力,以提高测定的灵敏度。

5、选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。

6、应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂,以保证工作人员的安全。

高效液相色谱仪的用处:

使用高效液相色谱仪时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。

高效液相色谱流动相的选择原则:

1、色谱醇的溶剂不要随意加满溶剂瓶

作为分析流动相,应避免不必要的浪费,防止污染环境,危害身体健康。应该根据样哦数量,计算需要使用的溶剂体积,添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质,在分析时导致基线抬高,对一些分析,特别是质谱分析造成影响。

2、配置酸或碱性流动相时要考虑pH范围

有些酸并不适宜作为流动相,如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。紫外分析时,样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm。

3、配置的盐溶液用滤膜过滤

常规液相用0.45µm滤膜过滤,高效液相色谱使用0.2µm滤膜过滤。水或缓冲盐溶液置于棕色瓶中,以防长菌,阻塞溶剂过滤器,降低泵的操作性能。质谱分析不能使用不挥发性盐作为流动相。使用挥发性盐作为流动相时,在保证分析的条件下,流动相中的盐尽量保持低浓度。

温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
相似回答