我们做绿色荧光蛋白试验，老师给我们留了个作业说绿色荧光蛋白基因的引物是如何设计的

Question

两个酶切位点分别是Hind Ⅲ和Xho I，问引物是如何设计。可能叙述的不太容易理解，主要是上课没好好学，好多东西都不知道，所以想咨询一下

Answer 1

在绿色荧光蛋白的前面后面二十个左右的bp作为引物，然后在前引物的前面和后引物的后面加上酶切位点。（如果你们老师有提到保护性碱基，就在最前面和最后面再加上保护性碱基。）

做老师不容易啊~好好听课！

Answer 2

不知道你要干啥，有现成的载体，而且GFP的基因序列随便查查就能找到，用限制性内切酶切下来，放到比如PGFP2-N3载体里就OK啊，你说那个两个酶切点，一般载体中multi-colony site都会有。
另外，你说的引物肯定不是指的GFP的引物，那要看你target sequence的序列

Answer 3

查你的老师上的那本书，找Hind与Xho的酶切序列，不会太长，然后在GFP基因两侧的引物分别和每一个引物一样。