浓盐法提取dna的优缺点

如题所述

优点是获得的DNA纯度高、片段大、效果好;缺点是操作较为繁琐

浓盐法:高盐沉淀法是酚氯仿抽提方法的一个变种,利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离。优点事省略了酚氯仿抽提操作的麻烦,并且几乎克服了酚氯仿抽提方法的一切缺点,只是得到DNA的纯度不够稳定。

提取dna的替他方法:

阴离子去污剂法:用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA。由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,同时阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA。

SDS法操作简单、温和,也可提取到较高分子量 DNA ,但所得产物含糖类杂质较多。

异硫氰酸胍/苯酚法(Trizol法):Trizol法是提取RNA的经典方法,在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时又能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。

水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。Trizol法适用于普通的植物组织、动物组织以及真菌和细菌等的RNA提取实验。

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