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大片段DNA搭桥PCR引物设计
实验室球要做大片段DNA的PCR,计划用搭桥。关于引物设计方面只能自己一点一点分段么?有没有软件可以一次性出来所有引物的?谢谢。
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推荐答案 2016-07-07
这都是分段设计的,还没有见过一次设计所有的引物,再说引物设计只有更好没有最好,加减一个碱基都有很大的变化。
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DNA
序列的
PCR引物设计
答:
1,
PCR引物
是利用碱基互补原则,通过找到一对合适的核苷酸
片段
,使其能有效地扩增模板
DNA
序列。2,首先要找到你用来
设计引物
的目的基因全序列,一般NCBI、Genebank上都能找得到。3,引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导 致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合...
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PCR引物设计
的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。
DNA
序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。2.引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度(primerlength...
引物设计
方法
答:
引物是在
PCR
(聚合酶链式反应)中用于扩增
DNA片段
的短序列。
引物设计
的目的是选择一对能够特异性地结合到所需扩增的DNA序列上,并且能够产生预期大小的PCR产物。以下是引物设计的一般步骤:1. 确定扩增区域:首先需要明确要扩增哪个DNA区域,例如基因的外显子、内含子或启动子等。2. 收集序列信息:从数据...
怎样
设计PCR引物
答:
引物设计
需要注意的地方很多,在大多数情况下,我们都是在知道已知模板序列时进行
PCR
扩增的。设计的目的是在两个目标间取得平衡:扩增特异性和扩增效率。引物分析软件将试图通过使用每一引物设计变化的预定值在这两个目标间取得平衡。设计引用有一些需要注意的基本原理:① 引物长度 一般引物长度为18~30碱基...
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设计引物
四、PCR引物设计的原则引物长度(primerlength):18-27bpGC钳(GCclamp:...
【科研】
PCR引物设计
原则
答:
遵循原则如下:1.
引物
长度:引物的最佳长度为24或25个碱基左右。但是如果需要调整Tm值,引物的长度可以控制在21至28个碱基之间。当扩增≥10 kb长
片段
时,25-35个碱基之间的引物可以提供更好的结果。引物过短,会降低产物的特异性,每增加一个核苷酸,引物特异性可以提高 4 倍。引物过长,会使退火...
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