大片段DNA搭桥PCR引物设计

实验室球要做大片段DNA的PCR,计划用搭桥。关于引物设计方面只能自己一点一点分段么?有没有软件可以一次性出来所有引物的?谢谢。

这都是分段设计的,还没有见过一次设计所有的引物,再说引物设计只有更好没有最好,加减一个碱基都有很大的变化。
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