就是将诱变处理的野生型菌株涂布在含有末端代谢产物的结构类似物的琼脂平板上，培养一段时间之后大多数细胞被杀死，而那些形成了抗性突变的君主则形成了菌落，从而得到不受末端代谢产物调节作用的突变株。
机制如下：细胞中过量代谢产物（
氨基酸A）会抑制和阻遏参与其生物合成途径的酶。氨基酸A可用于蛋白质的合成，氨基酸类似物A*（又称抗代谢物），具有与氨基酸A一样的调节作用，但不能用于合成蛋白质。经诱变处理的野生型在含有氨基酸类似物A*的
培养基中培养时，因为绝大多数细胞不能合成氨基酸A而死亡，只有那些对类似物A*不敏感的抗性突变菌株能合成氨基酸A，方能形成菌落。在这些突变菌株中，有些可能是由于参与氨基酸合成的酶结构起了变化，对类似物A*不敏感（抗反馈抑制的突变株），另一些可能是编码参与氨基酸A合成酶的
操纵子控制基因发生了突变，编码出没有活性的调节蛋白而对类似物A*不敏感（抗反馈阻遏的突变株）。由于这些君主对氨基酸A的合成失去控制，从而能过量的生产氨基酸A。 如筛选能抗
苏氨酸的结构类似物α-氨基-β-羟基戊酸的黄色短杆菌的突变株获得苏氨酸过量合成型菌株。
此种方法可用于过量合成氨基酸、
嘌呤、嘧啶和维生素。