pbmc分离方法及原理介绍

如题所述

pbmc分离方法及原理介绍如下:

PBMC分离方法及原理如下:

PBMC分离方法是一种生物技术,它可以将多种血液成分(如红细胞、血小板和淋巴细胞)分离出来,从而获得血液中纯的单克隆T细胞。

PBMC分离方法的原理是基于血液成分不同的密度,通过在双重密度梯度中离心,利用较低密度部分的小分子浮力将红细胞沉淀,从而获得纯化的单克隆T细胞。

外周血单核细胞(Peripheral blood monoculear cell, PBMC), 包括淋巴细胞(T细胞,B细胞和自然杀伤(NK)细胞)和单核细胞。而红细胞和血小板没有细胞核,而粒细胞(granulocytes) 包括中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞,有多叶核,所以不包括在PBMC中。

人类的PBMC主要由淋巴细胞组成,之后是单核细胞以及一小部分的树突状细胞(dendritic cells, DC).

PBMC的提取方法: 利用Ficoll将全血分层,之后进行梯度离心, 血液就会分离成一层血浆,然后是一层PBMCs和一层多形核细胞(polymorphonuclear ),如中性粒细胞和嗜酸性粒细胞,和底层红细胞。通过溶解红细胞可以进一步分离多形核细胞。嗜碱性粒细胞有时出现在密度较高的组分中和PBMC组分中。

注 : Ficoll: 一种亲水性多糖(hydrophillic polysaccharide )

PBMC起源于位于骨髓(bone marrow)的造血干细胞( hematopoietic stem cells, HSCs)。在造血干细胞的造血过程中,它们会产生髓系细胞(单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞、树突状细胞、红细胞)和淋巴系细胞(T细胞、B细胞、NK细胞)。

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