（1）湿度
一般湿度越大，杀菌效果越好。如硫磺熏蒸消毒时，空间和用具物品用水喷湿，比干燥时效果显著提高。
（2）温度
温度高，效果好。如苯酚、来苏尔加热至40℃以上杀菌作用明显增强。
（3）微生物种类
不同的微生物对于各种消毒剂有不同的敏感度，一般中温型类群的微生物，杀菌温度要高于低温型类群，而低于高温型类群。孢子、芽孢对高温、干燥及化学药剂的抵抗力要高于营养体细胞。
（4）时间和剂量
根据具体杀菌对象和培养基中微生物量而定，一般作用时间越长，效果越好。在致死剂量范围内，剂量增加，杀菌时间可减少，反之则需延长时间。
（5）微生物数量
培养基中微生物数量多，应延长杀菌时间和增加剂量。
（6）培养基成分
培养基中加入某些有机质，如肉汤中加入3%干酵母粉，苯酚的杀菌力将减弱30%；细菌悬液中加糖、蛋白质等，对它将产生不同程度的保护作用，减弱杀菌效果。
总之，任何一种化学消毒剂不可能对各类杂菌均有相等的杀菌能力，因此需几种消毒剂联合用、交替用或配伍用，促使起到增效作用，提高杀菌力，减少抗药性或耐药性菌株的产生，缩短消毒时间和维持药效稳定和增溶。如新洁尔灭用于器具表面消毒并不理想，若加入半量的酒精则增强其杀菌效果，前者破坏细胞膜，后者进入菌体；在漂白粉溶液中加氯化铵，能增强杀菌效力，它被称为漂白粉的活性溶液。消毒药剂配制时称量应精确，不用盐类、有机物及杂质硬水，要求现配现用。