77问答网
所有问题
植物种子提取RNA,反转录之后再进行pcr为了怎么样
如题所述
举报该问题
推荐答案 2022-06-01
为了物特异性。
1、控制好RNA提取过程,尽量减少RNA降解和基因组DNA的混入。
2、严重怀疑你的模板量过高,把模板稀释10-1000倍的梯度试试;
3、做二阶段温度pcr,先用稍高退火温度p上5循环,剩余的再用你现在的温度,或者有梯度pcr仪的话,做梯度pcr。
4、如果镁离子浓度较高,可稍降镁离子浓度做完可得出植物种子提取RNA,反转录之后会引发物特异性。
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://77.wendadaohang.com/zd/Gq3NYGqqp3Gq3v8qNvv.html
相似回答
植物种子提取RNA,反转录之后再进行pcr为了怎么样
答:
4、如果镁离子浓度较高,可稍降镁离子浓度做完可得出植物种子提取RNA,
反转录之后会引发物特异性
。
植物种子提取RNA,反转录之后再进行pcr为了怎么样
答:
反转录PCR
就是把
RNA提取后反转录
成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。由于巢式...
做荧光定量
pcr,
为什么要从细胞中
提取RNA
然后
反转录,
为什么不直接提取DNA...
答:
提RNA反转录
测实际测的是m
RNA,
最终结果表现的是细胞的转录水平差异。而直接测DNA实际是基因组定量,最终结果表现的是基因在细胞中的拷贝数。
如果
提取rna后进行反转录,再
设计引物
进行pcr
并没有得到基因,什么...
答:
OneShine SybrGreen preMix的Ct值出现更早,指数期上扬更快,平台期信号值更高,重复性更好,熔解曲线低温区平直、转折明显,熔解峰尖锐、单一;产生熔解温度差异的原因是OneShine SybrGreen preMix添加了一种特殊的酶保护剂,这种酶保护剂可以提升产品的冻融次数,有利于多次使用。
为什么跑
PCR
要用CDNA,而不用本身的DNA
答:
我们做的时候一般是
提取植物
总的
RNA,
然后采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶
反转录
成cDNA。再以cDNA为模板
进行PCR
扩增,主要是获得目的基因或检测基因表达,判断目的基因m
RNA转录
水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话,并不能证明该基因在其他细胞体内进行表达,通过这种方法可以克服假阳性。仅供参考...
通过将
rna
逆
转录,
荧光定量
pcr
能得到什么结果
答:
逆
转录PCR
是指用逆转录酶将
RNA转录
成DNA的过程。荧光PCR是指借助PCR扩增和荧光染料检测模板中目的基因含量的实验技术。
提取RNA后
做RT-
PCR,
跑电泳一条带都没有
答:
反转录后
要
pcr
扩增才能看到明显条带。要是随机引物反转录的,也许还能看到一条模糊的拖带。
大家正在搜
反转录病毒与反转录转座子
反转录pcr与常规pcr的异同
原核生物反转录转座子类型
逆转录pcr以什么为模板
PCR仪反转录cDNA
反转录转座子类型
反转录转座子存在于
反转录病毒的转录机制
病毒性反转录转座子