动物细胞核移植过程中，卵母细胞是怎么去核的？

Question

如题所述

Answer 1

动物自然受精的过程中，本是由卵细胞受精，然后发育成个体，因而卵细胞中包含了发育所需要的基本营养，而卵细胞又是由卵母细胞减数裂而来的，因而卵母细胞中也包含了发育所需要的基本营养，并且还未分化，具有全能性。而核杂交是要改变原有受体动物的遗传物质，改用供体动物的遗传物质，因而需要将卵母细胞去核。

Answer 2

从卵巢里排出来的卵细胞实际上是次级卵母细胞，处于第二次减数分裂的中期。核移植中，所用到的卵母细胞是在mii时期的，也就是细胞经过了第一次减数分裂，排出第一极体，在受精之前会停留在mii时期，做核移植时，使用显微注射的针穿透透明带和细胞膜，找到中期的纺锤体，将其吸出。第一极体不需要吸出，还存在于透明带中。

Answer 3

你好，和显微注射技术一样，在显微镜下吸出来的。如果你是高中的学生，这部分应该是选修三里的动物细胞工程内容，你问得这个问题是不需要理解和掌握的追问

减数第二次分裂中期，染色体排列在赤道板上，怎么会有核？

Answer 4

用细胞核移植技术，将一个细胞核用显微注射的方法注入另一个细胞里，，使核供体的基因得到完全复制，被激活分裂并发育成新个体。

Answer 5

(1)将CB溶于二甲基亚砜中(DMSO)，即1mLCB加1mLDMSO作为母液，4℃可存放三年，使用时以1：100加入培养基中，使其最终浓度为10μg/mL。
(2)培养用的塑料圆板的处理：用无毒的Polystyrene塑料圆板，厚度需1～1.5mm大小可随离心管直径大小而定，只需比离心管口径略小1～1.5mm，圆板两侧要有两个凹陷以便用镊子挟取，为了便于圆板的支撑和平衡离心，在离心管中加入一个圆筒状的塑料垫圈，垫圈高2～2.5cm，周边厚度为2cm，其外径应与圆板的大小相当，使其与离心管的口径略小，在离心管中可方便插入和取出，离心前应先把垫圈投入离心管中，把圆板稳固地扣盖在垫圈上(令其细胞朝下)，然后加入CB液略超过圆板，以浸没细胞。
离心管可用高压灭菌，塑料圆板垫圈可用60CO辐照，也可用95%酒精浸过夜，取出用无菌蒸馏水漂洗2～3次，用紫外线对其两面照射20～30分钟或更长后，即可使用。[1]
脱核程序
(1)用能贴壁生长的单层细胞，取数个塑料圆板置入平皿中，接种已制备好的细胞悬液，置37℃%CO2培养。
(2)待细胞形成单层时，在无菌条件下将细胞圆板扣盖在离心管的垫圈上，令细胞面向下，加入CB(10mg/L)培养基，使其淹没圆板为宜，为了防止圆板离心时翻转，在圆板上再放入同直径的圆柱形垂锤。
(3)有99%细胞的核被脱掉,为防止细胞丢失离心速度不要太高，离心时间不宜太长)。
(4)离心脱核后，沉于管底的为胞核，圆板上的细胞为脱核的胞质体，用PBS漂洗2次，每次1～2分钟可置入培养液基(不含CB)继续培养，使细胞恢复原先的正常形态。取出固定染色，也可进行细胞融合及染色质导入试验，或将胞膜、胞浆分离进行成分分析，或开展膜结构研究。沉于管底的核，因核周围仍包有薄层胞质和CB，可采用培养液漂洗1～2次，然后用于融合，或将核中染色质导入另一新细胞，或吸出涂片，固定，染色，制成标本。[1]