小鼠组织室温放过夜,蛋白和rna都降解了
提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。 将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。
胰腺组织含多种类型的细胞,要想提取胰岛A细胞的RNA,首先就必须将胰岛A细胞从胰腺组织的细胞群中分离出来,可以用流式细胞分选或磁珠分选等。 获得高纯度的胰岛A细胞后,再用TRIZOL或RNA提取试剂盒等将其RNA提取出来就行了。
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