活菌计数法具体操作

Question

如题所述

Answer 1

活菌计数法是一种常用的技术，用于测定样品中微生物的数量。首先，将待测样品进行适当的稀释，通常采用10倍递增的方式，目的是减少计数过程中的误差。选择三个不同稀释度的菌液，每份取0.2毫升，这是操作中的关键步骤，确保取样量适中且代表性强。

接着，将这0.2毫升菌液加入到预先准备好的无菌平皿中，然后倒入适量的已熔化并冷却至45摄氏度左右的培养基，轻轻搅拌，确保菌液与培养基充分混匀。冷却后，平皿中的混合物会凝固，此时将其放入适宜的温度环境中，如培养箱或温室，等待菌落的生长。

菌落形成后，对每个稀释度的平皿进行计数，确保有三个以上菌落出现，以保证结果的可靠性。计数结束后，使用公式计算每毫升原菌液中的活菌数：每毫升原菌液活菌数 = 同一稀释度的菌落平均数 × 稀释倍数 × 5。这个公式是活菌计数法的核心，它将观察到的菌落数转化为样品的原始菌含量。

此外，另一种方法是将稀释后的菌液涂布到已制备好的平板上，同样使用无菌涂棒均匀涂抹，然后置于适宜的温度下培养。计数平板上的菌落数，再利用相同的公式计算每毫升原菌液的活菌总数。