77问答网
所有问题
通过PCR怎样获得全长cDNA
如题所述
举报该问题
推荐答案 2010-06-26
序列已知了不?
知道了就在两端设计引物,以cDNA为模板PCR扩增就行了;
不知道就先把序列搞出来。
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://77.wendadaohang.com/zd/G3YWN8pNq.html
其他回答
第1个回答 2010-07-01
cDNA=ORF+5UTR+3UTR
ORF can usually be obtained from NCBI. UTR needs to be explored by TAIL.
相似回答
通过PCR怎样获得全长cDNA
答:
从
cDNA的
两端设计引物,
用
没有DNA污染
的cDNA
为模板即可扩增
得到
。
怎样得到
一种基因
的cDNA
,求具体步骤
答:
4. 下面的步骤取决于你对该基因序列的知道情况。
如果全序列已知,那就设计一对针对首尾的PCR引物,直接做RT-PCR,就可以得到全长cDNA了
。如果只知道其中一段,那就先把mRNA用随机引物反转录为cDNA,建立cDNA文库。然后用已知的序列设计探针,在文库中寻找 ...
通过PCR怎样获得全长cDNA
答:
知道了就在两端设计引物,以
cDNA
为模板
PCR
扩增就行了;不知道就先把序列搞出来。
cDNA
末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)_百度知...
答:
【答案】:是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术
。是一种基于mRNA反转录和PCR技术建立起来的、一部分的一直区域为起点,扩增基因转录本的未知区域,从而或得mRNA(cDNA)完整序列的方法。简言之就是从低丰度的转录本中快速增长cDNA5'和cDNA3'末端,进而获得全长cDNA的简单有效的方法。该方法具有快捷、方便...
...两端的序列未知,
如何用PCR
的方法扩增
全长的cDNA
序列?
答:
如果有条件,还是应该RACE,这是
得到全长
最正统的办法。知道几十bp应该够用了。另外我奇怪的是,NCBI上没有你需要的蛋白的mRNA序列吗?猪是Sus scrofa,不妨再找找。既然小鼠和人里面都有,猪里面应该也有。你再去找找吧。如果能找到,设计引物就简单了。还有一个办法,就是查查文献,有没有人以猪为...
RACE
PCR
RACE产物的验证
答:
获取全长cDNA
有多种途径:
PCR
方法:设计5'和3'GSP引物,根据RACE产物序列进行扩增。注意控制延伸时间和引物设计,避免拖带和高背景。
通过
电泳和琼脂糖凝胶纯化得到全长。 克隆方法:利用5'和3'RACE产物重叠区的酶切位点连接产物,然后克隆到载体中。在操作过程中,务必关注接头和引物设计,以确保特异性...
我知道某目的基因
的cDNA
序列,要
pcr
扩增此基因
cDNA全长
,引物
怎样
...
答:
如果是要表达该基因的话把CDS区扩增出来就可以了 想扩增全场的话只能引物设计在前后端了 不过后面是Poly T, 所以估计反转录的时候
得
加一个adapter 这样才能扩增完整的出来 还是比较麻烦的 而且
全长
的话太长了 要
用
高保真的酶 很容易出现错配和突变 ...
大家正在搜
第二长河全长有多少千米
我国的第二长河全长有多少米
长江全长为
长江全长是多少
长全
全长是什么
全长等于什么
全长是什么意思
车辆全长