千芝堂开业于清乾隆十年（1745年），也是一家有名的老字号。原址位于崇文门外大街路东，1991年迁到了前门大街。
千芝堂的首位创业者现在已无法考证，人们只知道在光绪七年（1881年），有一个叫吴霭亭的富商将千芝堂买了下来。之后，他聘请既懂药材炮制，又精于买卖经营的王子丰替他管理。
在王子丰的精心管理之下，千芝堂的买卖做得很有起色。
光绪二十六年（1900年）庚子事变时，千芝堂将有钱人家低价出售的贵重药材买了下来，等战乱过后即发了大财。
后来，由于经营内部产生矛盾，王子丰离开千芝堂，自己开设了庆仁堂。千芝堂则改由吴受臣经营。吴受臣同样精通经营管理之道，千芝堂和庆仁堂在激烈的竞争中，都有所发展。
千芝堂的丸、散、膏、丹都是自己加工制作的，所需药材也都要经过严格筛选。一般进货主要有三个渠道。一是从祁州庙会药材市场进货。
祁州庙会就是河北省安国县的药王庙会，每年春、秋两次开庙。因为庙会上药材品种齐全，千芝堂每年都派专人前去采购，这也成为一条主进货渠道。
如果所购药材不齐全，千芝堂会派人分赴全国各地选购名优药品或者从本市大药栈进货。不管从何种渠道进货，质优是千芝堂的首选。
千之堂经营的"汤剂饮片"和"丸、散、膏、丹"，都要经过认真的加工炮制。汤剂饮片都是中草药加工制作，如半夏需经过用清水、石灰、矾、甘草、生姜等几道工序，前后需49天才能完成。又如天麻、玉金、元胡等都需用刀切成薄片才能在煎煮时充分发挥药效。
中成药"丸、散、膏、丹"的炮制，既要讲究配方，还要选料真实、质优，并且要依古法炮制。
为提高千芝堂的社会声誉，每年入夏，千芝堂都会在店铺门前搭起遮阳席棚，为路人提供消暑汤和祛热消暑的药品，这种做法赢得了人们的广泛赞誉。
千芝堂药铺经营既有零售，也搞批发。京城的小药店慕名而来购药的很多，城郊的药铺和外埠的药商也常来批发药品。
1949年新中国成立后，千芝堂参加了公私合营，后转为国营药店。