第1个回答 2011-09-16
HPLC-ELSD法对麦片中蔗糖含量的测定
关键词：ELSD，蔗糖 GB 5413.5-2010 ELSD 蔗糖 食品
摘要：本报告参照了食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定建立了HPLC-ELSD法对麦片中蔗糖含量的测定。蔗糖标准品在1~5mg/mL范围内线性关系良好，相关线性系数R为0.996~0.997。同时应用HPLC-ELSD法对麦片中蔗糖的含量进行检测，检测快速，结果准确可靠。
实验部分：
1. 仪器
仪器：LabTech P600-ELSD 高效液相色谱仪
色谱柱：LabTech 氨基柱( 4.6mm*250mm，5μm)
天平：感量为0.1mg
超声波振荡器。
2. 药品及试剂：
蔗糖标准品：50mg，国家标准物质中心
乙腈：色谱纯
3. 实验内容
3.1. 标准溶液制备
蔗糖标准储备液：称取蔗糖标准品500mg并用水稀释至100ml容量瓶中，浓度为5.00mg/mL。
蔗糖标准工作液：分别准确吸取不同体积蔗糖标准储备液，将其稀释为蔗糖含量分别为1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL的混合标准使用液。
3.2. 试样处理
称取固态试样1g（精确到0.1mg）于50ml容量瓶中，加15ml 50℃-60℃水溶解，于超声波振荡器中振荡10min，用乙腈定容，通过0.45um滤膜过滤，滤液供色谱分析。可根据具体试样进行稀释。
3.3. 色谱条件：
流动相： 乙腈：水=70:30
流速： 1.0 mL/min
色谱柱： LabTech 氨基柱， 4.6mm*250mm，5μm
进样量： 20μL
柱温： 30℃
蒸发光散射检测器条件：漂移管温度：80℃
雾化管温度：20℃
3.4. 测定
取蔗糖标准工作液和试样各20μL注入HPLC-ELSD进行分离测定，以其标准工作液的保留时间（取对数）和峰面积（取对数）为据制定标准曲线，以试样峰面积代入标准曲线中测定试样中蔗糖含量。
4. 实验结果
4.1. 蔗糖标准品的分离分析
根据实验条件3.3分离分析蔗糖标准品
蔗糖标准溶液（1mg/mL，2 mg/mL，3 mg/mL，4 mg/mL，5 mg/mL）色谱图。
序号 名称 保留时间（min） 浓度(mg/mL) 峰面积
1mg/ml 蔗糖 3.037 1 1424250
2mg/ml 蔗糖 3.043 2 2112699
3mg/ml 蔗糖 3.019 3 2503803
4mg/ml 蔗糖 3.027 4 2791128
5mg/ml 蔗糖 3.036 5 3266719
4.2. 标准曲线的绘制
将浓度分别为1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL的蔗糖标准工作液，按3.3的色谱条件，各吸取20μL进样分析，根据各组分的响应峰面积与相应的质量浓度进行线性回归，绘制标准曲线，相关线性系数均达到0.996以上。曲线线性关系和相关系数如下所示
蔗糖标准曲线线性关系和相关系数
4.3 样品分析结果
4.3.1将实验3.2处理好的麦片样品根据条件3.3进行分析,样品检测平行三次1#、2#、3#，分别重复进样三次，样品中蔗糖检测浓度及样品中含量的计算值见下表。
麦片中蔗糖含量
样品浓度计算 1#浓度(mg/mL) 2#浓度(mg/mL) 3#浓度(mg/mL) 平均浓度(mg/mL) 样品含量（mg/g）
蔗糖 1.773 1.824 1.796 1.798 89.9
麦片试样1#,2#,3#中蔗糖分离分析色谱图：
麦片试样分析色谱图1
麦片试样分析色谱图2
麦片试样分析色谱图3
实验结论：
本实验采用HPLC-ELSD法将麦片中的蔗糖完全分离检测。在1~5mg/mL范围内线性关系良好。结果表明麦片中含有一定量蔗糖，浓度约为90mg/g。采用HPLC-ELSD法检测蔗糖方法快速，结果准确，可广泛应用于食品、饮料等行业。