共聚焦共焦显微

Question

如题所述

Answer 1

共焦显微技术，由M.Minsky在1957年提出，旨在消除普通显微镜的散射光问题。1960年代，通过提高扫描精度，共焦显微镜在80年代成为商用设备。分为普通照明和激光照明两种，后者更受欢迎。

激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）是生物学研究的重要工具，它在荧光显微的基础上加入激光扫描和数据处理，可在亚细胞水平观察钙离子变化，探究细胞生理活动与形态运动的关联。广泛应用于形态学、分子细胞生物学等领域。

其工作原理是，激光束通过光栅形成点光源，逐点扫描荧光样本，仅接收焦平面处的光信号，避免衍射和散射干扰，提供高分辨率图像。共焦显微镜由五部分构成：显微光学系统、扫描装置、光源、检测器和软件系统。

显微光学系统采用无限远光学结构，物镜选择大数值孔径以提高图像清晰度。扫描装置包括XY平移和阵镜摆动，光源有单色或多色，检测器常用光电倍增管，软件则用于图像处理和坐标对应。

从发展看，共焦显微技术经历了多次改进，如激光源选择、扫描技术的提升，以及新型激光共聚焦显微镜如针孔阵列盘式和双光子显微镜的出现。针孔阵列盘式显微镜提供快速成像，双光子显微镜则解决光漂白问题，对活细胞研究更为理想。

共焦显微的应用广泛，包括组织细胞荧光标记分析、离子浓度测量、荧光光漂白研究、细胞迁移和生长观察，以及细胞损伤实验等。