土壤DNA提取试剂盒原理与操作

Question

如题所述

Answer 1

在土壤DNA提取过程中，首先，将土壤样品与悬浮缓冲液Buffer C1混合，随后加入玻璃珠和专利的腐殖酸吸附剂Buffer C2。通过涡旋搅拌，土壤充分分散，使腐殖酸能有效从土壤中释放出来，吸附在吸附剂上。接着，加入高效裂解液Buffer C3，借助玻璃珠的摩擦作用，裂解土壤中的各种生物，包括G+细菌、酵母菌、真菌、藻类、线虫以及真细菌的孢子、芽孢和动植物遗体，释放出游离的DNA。

然后，加入沉淀剂Buffer C4，通过离心操作，可以清除土壤残渣、吸附有腐殖酸的吸附剂、多糖多酚以及大部分色素，留下清亮且富含DNA的上清液。将上清液与异丙醇混合，DNA粗品由此形成。粗品中再加入ddH2O溶解，接着使用Buffer C5进行离心，进一步去除腐殖酸等杂质，得到的上清液中再加入乙醇，将DNA转移到硅胶纯化柱中进行吸附，以除杂。经过漂洗液Buffer WB的离心处理，进一步去除蛋白质和腐殖酸，同时用DNA Wash Buffer去除盐分等其他杂质。

最后，干燥柱子后，用灭菌去离子水离心，得到高纯度的DNA。这个过程精心设计，确保了DNA提取的高效和纯度，为后续的实验或分析提供了关键的生物样本。