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蛋白质复性的方法有哪些
基因工程表达目的蛋白时常用
蛋白质
变性和
复性方法
来纯化
蛋 白质
,为什么...
答:
所以,原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面, 而亲水基团在表面的分布则相对减少, 至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜, 很容易引 起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
复性
:如果变性条件剧烈持久,
蛋白质的
变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性 作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的...
蛋白质的
变性,
复性
,以及高级结构不太稳定的原因
答:
蛋白质的
高级结构主要是靠次级键维持的,如氢键、范德华力等。这些次级键很弱,靠多个协同来维持构象。在低温时还算稳定,温度一高,就很容易被破坏。所以高级结构不太稳定,也就是容易变性。蛋白分子大,结构复杂,一旦变性,很容易变成一团乱麻,所以
复性
比较困难。二硫键也确实不太稳定,数量也不多...
SDS-PAGE后
蛋白质复性
答:
想获得这个酶的分子量,不用复性那么麻烦。先查资料,看SOD分子量应该是多少,每个亚基多大。然后把你的酶做个SDS-PAGE,相应大小处很亮就对了。杂蛋白不会影响SDS-PAGE结果。如果要纯化,层析更好一些。如果非要电泳,也可以跑非变性胶,
蛋白复性
很麻烦的。
蛋白质
变性的作用
答:
天然蛋白质因受物理的或化学的因素影响,其分子内部原有的高度规律性结构发生变化致使
蛋白质的
理化性质和生物学性质都有所改变,但不导致蛋白质一级结构的破坏,这种现象称为变性作用。变质蛋白质主要标志是生物功能的丧失.从现在蛋白质构象研究结果来看,可以比较完整的说:变性作用就是蛋白质在一定的处理...
蛋白质的
一些性质
答:
蛋白质的
沉淀:蛋白质的肽链相互聚集而从溶液中析出的现象。在温和条件下,通过改变溶液的pH或电荷状况,使蛋白质从胶体溶液中沉淀分离。在沉淀过程中,结构和性质都没有发生变化,在适当的条件下,可以重新溶解形成溶液,所以这种沉淀又称为非变性沉淀。可逆沉淀是分离和纯化蛋白质的基本
方法
,如等电点...
蛋白质
变性了能恢复吗
答:
如果变性条件剧烈持久,
蛋白质的
变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。例如盐析,盐析是一种与蛋白质的沉淀的性质相关的分离
方法
:它用硫酸铵、硫酸钠等中性盐来破坏蛋白质在溶液中稳定存在的两大因素,故能使蛋白质发生沉淀。不同蛋白质分子颗粒...
包涵体实验
方法
答:
对于目标
蛋白的复性
,通常从4M尿素浓度开始,逐渐降至2M,而对于盐酸胍,从4M开始,至1.5M时复性过程已完成。复性过程中,通过逐步降低变性剂浓度和去除还原剂,目标蛋白会从伸展状态恢复到正常折叠结构,确保其功能完整。常见的
复性方法包括
逐步降低尿素浓度和控制还原剂的去除时机。
分析归纳影响
蛋白质复性的
主要环境因素
答:
1、溶液pH:蛋白质的复性通常在接近其等电点的pH值下进行,因为此时蛋白质分子间的静电相互作用最小,有利于蛋白质的折叠和复性。2、离子强度:离子强度对
蛋白质复性
也有影响。高离子强度下,蛋白质分子之间的相互作用增强,可能导致蛋白质复性速度减慢。3、温度:温度可以影响蛋白质的折叠和复性过程。
蛋白质
空间结构改变,可能会导致蛋白质失去生物活性,这种改变一定是不可...
答:
这种变性作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时,如果除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性,这种现象称为
蛋白质复性
。例如胃蛋白酶加热至80~90℃时,失去溶解性,也无消化蛋白质的能力,如将温度再降低到37℃,则又可恢复溶解性和消化蛋白质的能力。
什么是
蛋白质的复性
和变性
答:
这种现象称为蛋白质变性。如果变性条件剧烈持久,蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时,如果除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性,这种现象称为
蛋白质的复性
(renaturation)。
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