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尿素变性的蛋白如何复性
什么是DNA?
视频时间 01:22
仅分子生物学阳性病人分类
怎么
写?
答:
利用这一原理可分离纯化细胞提取物中特定DNA结合
蛋白
8、简述PCR的工作流程,原理与应用 原理:利用DNA复制的半保留复制和DNA
变性
与
复性
的特性,用特异性引物对模板DNA进行指数扩增。 流程:首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生
退火
,再将温度升高使退火...
DNA与RNA的分布???
答:
DNA分布在细胞核,线粒体,叶绿体.RNA分布在细胞核(rRNA,mRNA),线粒体,叶绿体,核糖体,细胞质中.对于原核生物来说DNA分布在细胞质.RNA分布在细胞质和核糖体中.
请教膜
蛋白
包涵体表达纯化
复性
答:
您好!您这里可能有些概念错误。① 包涵体就是
蛋白的变性
聚集后的产物,6M盐酸胍及8M
尿素
是作为溶解包涵体的溶剂。②
复性
的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。梯度离心或者差速离心去除细胞...
为什么动物的内脏被煮熟后仍然富含
蛋白质
,蛋白质不会
变性
吗
答:
在β巯基乙醇和8M
尿素
作用下,发生变性,失去生物学活性,变性后如经过透析去除尿素,β巯基乙醇,并设法使疏基氧化成二硫键,酶蛋白又可恢复其原来的构象,生物学活性也几乎全部恢复,此称变性核糖核酸酶
的复性
.许多
蛋白质变性
时被破坏严重,不能恢复,称为不可逆性变性 ...
二硫键的作用
答:
功能:二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关同时与
蛋白质的复性
也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和
尿素
(
蛋白质变性
剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在...
GSH-GSSG体系在
蛋白质复性
中的作用?
答:
类似的实验还有Anfinsen的核糖核酸酶变性、复性实验,其中复性过程中起着类似作用的是巯基乙醇。实验中
尿素
是
蛋白质变性
剂,巯基乙醇是巯基还原剂。
蛋白质复性
过程中二硫键的结合不会自然的与原蛋白质中对应的巯基(SH-)对应,因而存在错配现象,在存在微量巯基乙醇的条件下,会保持溶液的还原条件,允许“...
蛋白质变性
是否可逆?是否涉及共价键?变性与变构
有何
区别
答:
变性并非是不可逆的变化,当变性程度较轻时,如去除变性因素,有
的蛋白
质仍能恢复或部分恢复其原来的构象及功能,
变性的
可逆变化称为
复性
。例如,前述的核糖核酸酶中四对二硫键及其氢键。在β�巯基乙醇和8M
尿素
作用下,发生变性,失去生物学活性,变性后如经过透析去除尿素,β�巯基...
包涵体
复性
过程中,用盐酸胍和
尿素
哪个好,有什么区别
答:
包涵体
复性
过程中,用盐酸胍和
尿素
哪个好,有什么区别 ① 包涵体就是
蛋白的变性
聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂.② 复性的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成.所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度.
包涵体纯化
蛋白复性
案例分析——钟鼎生物
答:
1: 未诱导 2: 诱导后 3: 诱导破碎后上清 4: 诱导破碎后沉淀 包涵体
蛋白
的变
复性
1. 将菌体沉淀重悬于20 ml 裂解液 (20 mM Tris-HCl containing 1 mM PMSF and bacteria protease inhibitor cocktail, pH 8.0),超声破碎(功率400 W,工作4sec,间歇8sec,共20min);2. 将超声破碎的...
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