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尿素变性的蛋白如何复性
尿素
包涵体
蛋白
可以用离子交换纯化吗
答:
包涵体用8M
尿素
还不溶解该
怎么
①包涵体就是
蛋白的变性
聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂。②
复性
的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。
蛋白质变性的
本质是什么?导致蛋白质什么性质的变化?
答:
蛋白质变性的
本质蛋白质受物理或化学因素的影响,改变其分子内部结构和性质的作用。引起蛋白质变性的原因可分为物理和化学因素两类。能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、
尿素
、丙酮等;能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。
基因工程表达目的蛋白时常用
蛋白质变性
和
复性
方法来纯化
蛋 白质
,为什么...
答:
变性
后次级键被破坏,
蛋白质
分子就从原来有序的卷曲的紧密结构变为无序的松散的伸展状 结构(但一级结构并未改变)。所以,原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面,而亲水基团在表面的分布则相对减少,至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜,很容易引 起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
复性
:如果...
基因工程表达目的蛋白时常用
蛋白质变性
和
复性
方法来纯化
蛋 白质
,为什么...
答:
所以,原来处于分子内部的疏水基团大量暴露在分子表面, 而亲水基团在表面的分布则相对减少, 至使蛋白质颗粒不能与水相溶而失去水膜, 很容易引 起分子间相互碰撞而聚集沉淀。
复性
:如果变性条件剧烈持久,
蛋白质的变性
是不可逆的。如果变性条件不剧烈,这种变性 作用是可逆的,说明蛋白质分子内部结构的...
在包涵体细胞的
变性
与
复性
中实验中,最有可能用到哪个
答:
您好!您这里可能有些概念错误。① 包涵体就是
蛋白的变性
聚集后的产物,6M盐酸胍及8M
尿素
是作为溶解包涵体的溶剂。②
复性
的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。梯度离心或者差速离心去除细胞...
关于生物的问题(请解释原因)
答:
C.蛋白质的空间结构被破坏啦,就是变性。因为蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,这种现象称为
蛋白质变性
。
丙酮沉淀得到
的蛋白
溶于8m
尿素
,可以用脱盐柱除盐吗
答:
包涵体用8M
尿素
还不溶解该
怎么
办 ① 包涵体就是
蛋白的变性
聚集后的产物,6M盐酸胍及8M尿素是作为溶解包涵体的溶剂。②
复性
的过程是逐步去除盐酸胍或者尿素,从而使得蛋白天然构象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M盐酸胍进行包涵体溶解,这个过程中逐步降低的是盐酸胍的浓度。
包涵体染色的方法有哪些?原理是什么
答:
去垢剂结合其他的试剂或者溶解增强剂也被使用,发现
尿素
和乙酸,尿素和二甲亚枫,尿素和高pH等是比较有效的溶解包涵体
蛋白质
的方法。高压(1-2kbar)、超声也可以溶解包涵体蛋白质,此时使用的溶解试剂浓度可以比较低,便于后续
的复性
步骤。3. 极端pH酸碱度也是比较廉价的有效的溶解包涵体的方法。最经常使用酸的是有机酸,...
基因组DNA提取中细胞裂解液
怎么
配制
答:
,1 mM EDTA(
变性
剂和稳定剂),5 μg/ml Aprotinin(
蛋白
酶抑制剂),5 μg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂).7M
尿素
,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解),蛋白酶K等....
请问:DNA为什么带负电?
答:
因为DNA含有磷酸残基,而磷酸残基带负电。
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