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亚细胞定位几天后还能拍摄到
亚细胞定位
烟草侵染后遮光多久
答:
2-3天
。根据查询亚细胞定位实验得知,在便携式长波长紫外灯下检测GFP荧光信号灯下,亚细胞定位烟草侵染后遮光2-3天之后,是最佳表达时段,才可以提取蛋白,检测蛋白的含量。亚细胞结构则指一般是电子显微镜((EMs)下才可见的细胞结构。
基因枪
亚细胞定位
可以维持多久
答:
为明确已知基因产物在细胞中的表达位置,如转录因子一般在细胞核内表达,就要做基因表达的
亚细胞定位
。一般方法是将目标基因与GFP(绿色荧光蛋白)构建融合蛋白表达载体,然后通过基因枪的方法将载体转入洋葱表皮细胞中,在利用荧光显微镜观察绿色荧光在细胞中的位置。因为洋葱表皮细胞较大,容易观察表达部位。
洋葱
亚细胞定位
多久观察
答:
洋葱
亚细胞定位
5分钟后观察。亚细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞内的具体存在部位,做完细胞采样后,五分钟后在进行观察。例如在核内、胞质内或者细胞膜上存在。GFP是绿色荧光蛋白,在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以精确地定位蛋白质的位置。
【小远答疑】
亚细胞定位
常见问题
答:
2. 物种差异的挑战: 同一载体在不同物种中的表现可能差异显著,受体材料的选择至关重要。为了获得准确的
定位
,推荐选择与目标基因来源相近的
细胞
进行实验。3. 水稻原生质体的绿色奥秘: 黄化苗中的叶绿体较少,因此在定位时,除非有特殊目的,通常不
拍摄
自发的叶绿体荧光,以避免混淆。4. 对照的力量: 提供...
为了更好研究HD1基因的
亚细胞定位
,我们构建了含有35s启动子:HD1-GFP的...
答:
pH5.7】)+20uM AS;)将农杆菌稀释至OD600=1左右,室温活化3h;5 用注射器注射烟草成熟叶片; 6 避光2-3天; 7 Confocal 观察 成败关键:1 农杆菌菌株毒力强一点好EHA105,GV3101比较好,LBA404不好;2 AS诱导;3 农杆菌需要一定时间活化; 4 所用烟草要健康,叶片要大而平整,方便注射 ...
烟草
亚细胞定位
图怎么看
答:
用共聚焦显微镜看。
亚细胞定位
,其用到的方法基本都是融合报告基因定位法,通过瞬转烟草叶片或原生质体在共聚焦显微镜下拍照观察到的结果。亚细胞定位可将某种蛋白或者表达产物定位于细胞中的具体位置,如细胞核内、各种细胞器以及质膜上,从而为理解基因的作用机制提供研究方向。
亚细胞定位
答:
如仅在核内存在,还是胞质内存在,还是细胞膜上存在。GFP实际是给你要研究的物质加上标记。使用GFP必须构建融合蛋白载体,并有效表达。这样在荧光显微镜下,如果看到细胞内某一部位存在GFP信号,则说明和GFP融合的蛋白也存在于该部位,这样就达到了确定某物质
亚细胞定位
的目的。
免疫荧光
定位
答:
我就在做这方面的研究工作,如果需要的话可以共同探讨。举例:对细胞微管蛋白进行
亚细胞定位
,,用低聚甲醛固定细胞,NP-40穿孔,选择抗微管蛋白的抗体作为一抗,孵育后洗脱去背景,加入偶联荧光素的二抗孵育后洗脱去背景,,上荧光显微镜观察。希望能够对你有所帮助。
洋葱表皮
亚细胞定位
为什么看不到荧光
答:
洋葱表皮
亚细胞定位
为什么看不到荧光 目前进行亚细胞定位研究,提取拟南芥(Arabidopsis thaliana)(Arabidopsis thaliana)叶肉原生质体进行PEG转化。研究目标采用GFP/YFP融合蛋白,但是在LSM710观察时,叶绿体有很明显的背景,尽管有些细胞是明显看到了GFP荧光,远远强于叶绿体背景,但是拍的照片只看得出叶绿体的形状...
亚细胞定位
问题
答:
亚细胞定位
不是研究某个基因的表达量,而是研究该基因在细胞中的位置。在目的蛋白末端连接绿色荧光蛋白就可以在荧光显微镜下直接观察该蛋白所处的位置。RT-PCR只能分析RNA的表达量,不能确定该RNA翻译的蛋白位于细胞的哪个位置。
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