第1个回答 2014-12-12
第一章 中药药理学实验须知
中药药理学实验课是中药药理教学的一个重要组成部分。在生理学和药理学实验基础上,在讲授中药药理的同时,开展中药药理的实验,它的目的和任务一方面是验证理论、巩固并加强对理论知识的理解;另一方面是通过实验,进一步提高学生的动手能力,培养学生能用现代科学方法从事中药理论研究和新药开发的初步工作能力,为今后进行科学研究,打下初步基础。
中药药理实验包括进行实验操作、整理实验结果和写出实验报告等环节,为提高实验效果,必须做到:
一、明确实验的目的要求:实验前应作好预习,明确本次实验的目的、方法、步骤和原理,作到心中有数,这样,才能在实验过程中避免出现忙乱和差错,并在教师指导下,培养独立操作的能力。
二、作好实验结果的处理:中药药理实验结果有计量资料(如体温、尿量)及计数资料(如动物死亡数)。要忠实地准确的对观察到的数据及时加以记录,决不可想当然的用主观想象或书本理论代替实验观察到的客观事实。实验完毕,应对结果加以整理:注明实验题目、实验日期、动物性别、体重、给药剂量等;计数资料和计量资料应列表以便比较,使之一目了然。
三、写好实验报告:写实验报告是培养文字表达能力和概括、综合、分析问题能力的重要训练方法。每次实验完毕以后,要求以统一的实验报告纸写出实验报告,交负责教师评阅。在实验报告中要求列出实验题目、实验方法和实验结果。有时要对实验结果产生的原理或对实验结果异常的原因略加讨论。讨论不可离开实验结果去抄书。实验指导所列思考题或讨论题是为加深对实验的理解,与实验结果无关的内容,不必写入实验报告。最后把实验结果加以概括性总结,写出结论。结论不是单纯重复实验结果,也不应超过验证的范围任意外展,扩大结论。实验报告要求文字简练,书写工整,措词注意科学性和逻辑性。
第二章 中药药理实验基本知识与技术
第一节 常用动物简介
在中药药理实验中,常根据实验目的和要求选用不同的动物。常用的实验动物有蛙、小鼠、大鼠、豚鼠、猫和犬等。在选择实验动物时,应注意实验动物对动物的种属和系别方面的要求,因为动物的种属和系别的差异往往会造成对药物反应性的不同。应使所选的动物能较好地反映试验药物的选择性作用,并符合节约的原则。例如测定LD50及ED50需较多动物,常选用小鼠,因为小鼠种属清楚,繁殖快,较经济;又如抗过敏实验常选用豚鼠,是由于豚鼠对组胺等过敏性介质敏感。
常用实验动物的特点如下。
1. 蛙和蟾蜍
其心脏在离体情况下能较持久而有节律地搏动,故常用来研究药物对心脏的作用。其坐骨神经腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经横纹肌或神经接头的作用。
2. 小鼠
小鼠是药理实验最常用的一种动物,适用于需要大量动物的实验,如LD50 和ED50的测定,抗炎免疫药、抗肿瘤药、避孕药、中枢神经系统药物等的研究和药物初筛。
3. 大鼠
用途与小鼠相似。因其体形较大,有些在小鼠身上不便进行的实验可选用大鼠。如药物的抗炎实验常选用大鼠的踝关节做炎症模型。可用大鼠进行血压测定,胆管插管和长期毒性实验,还可用其离体子宫做子宫收缩药的检定。此外,尚可用来复制糖尿病模型,用于糖尿病药物的研究以及流感病毒传代及细菌学实验等。
4. 豚鼠
豚鼠易被抗原性物质所致敏,对组胺特别敏感,常用于平喘药和抗组胺药的实验研究。对结核杆菌比较敏感,故也用于抗结核药的实验研究。此外还用于离体心脏、平滑肌实验。
5. 家兔
家兔较驯服,易饲养。常用于观察药物对呼吸、心脏、血管(离体兔耳血管灌流)、肠肌运动的影响,体温实验及热源检查。用于避孕药实验(雌兔)或观察药物对皮肤局部作用(刺激性)。
6. 猫
猫对于脑实验和其他外科手术耐受力强,反射功能强,血压较稳定。常用于观察药物对心血管的影响。可用于中枢神经系统实验,如去大脑僵直,姿势反射实验;猫也常用于镇吐药的实验。
7. 犬
实验需用大动物时,常用犬。犬是记录血压、呼吸最常用的动物。常用于观察血流动力学药物对冠状动脉血流量和心肌电生理的影响,以及对降压药、抗休克药的研究等。犬还可通过训练,用于慢性实验研究,如条件反射、高血压的实验治疗以及造胃瘘、肠瘘来观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响的实验。此外,犬也用于长期毒性实验。
第二节 实验动物的捉持、固定和标记方法及分组
一、实验动物的标记
实验用较大动物如兔、猫、犬等可用特制的号码牌固定于耳上。白色家兔和小动物(小鼠、大鼠)可用黄色苦味酸(3%~5%)涂于毛上标记。其编号方法无统一规定,以下方法可供参考。
如给小鼠标记1~10号,可将小鼠背部分为前肢、腰部、后肢,按左、中、右分为九个区域,从右到左标记1~9号,第10号不标记。
二、常用实验动物的捉持、固定方法
1、小鼠:用右手提起鼠尾,放在粗糙物(鼠笼盖)上面,向后轻拉其尾,左手拇指、食指捏住其颈背部皮肤,将小鼠固定在掌中,使其腹部朝上,然后以无名指和小指夹住鼠尾。
2、大鼠:捉持和固定方法基本同小鼠。将其放于鼠笼盖上,右手轻拉鼠尾,左手中指和拇指放到大鼠双前肢腋下,食指放入颈部,使其伸开前肢迅速将其握住。
3、豚鼠:一手拇指和中指从豚鼠背部伸到腋下,另一只手托住其臀部即可。体重小者可用一只手捉拿。
4、家兔:一手抓住颈背部皮肤,轻轻将兔提起,另一手托住其臀部,或将其置于固定箱内。
5、猫:捉持方法同家兔,但应注意其利爪和牙齿会损伤人。为保安全多用套网捉拿,用固定袋固定。
6、犬:对驯服犬,可用特制嘴套将犬嘴套住,并将嘴套上的绳带拉至耳后颈部打结固定。对凶暴的犬,用长柄钳式捕犬夹钳住其颈部,再用嘴套将犬嘴套住。如无嘴套,可用绳带绑嘴,方法是在犬嘴的上下部打结并绕到颈后再打结固定。
急性实验时,通常将犬麻醉后仰位固定于手术台上。四肢栓上绳带,拉紧固定在手术台边缘的锲子上。取下嘴套或绳带,将一金属棒经两嘴角穿过口腔压于舌上,并将舌拉出口腔,再用绳带绕过金属棒绑嘴并固定于手术台的柱子上。
三、实验动物的随机分组法
数理统计学上,根据随机抽样的原则,编制了随机数目表,应用随机数目代替抽签法。表中的数字都各自独立,全部数字无论从横行、纵列或斜行的顺序都是随机的。因此使用时可任自一个数目开始,可从左而右,亦可从右而左,可从上而下,也可从下而上,按顺序取得需要的数目,其结果比抽签更为理想。
(1)完全随机法
(2)配偶设计随机分组法
(3)随机单位组设计分组法本回答被提问者和网友采纳