四氯化碳在制备血红蛋白滤液中的作用

如题所述

第1个回答  2014-01-02
氯化碳溶血法:将EDTA抗凝全血除去血浆,用生理盐水洗去细胞外的杂质,加入蒸馏水溶血,用四氯化碳(AR)溶解,提取脂溶性物质,沉淀细胞膜及基质蛋白,经离心后,上层为澄清透明的血红蛋白液,其具体操作步骤是:新鲜抗凝静脉血离心除去血浆。用生理盐水洗涤红细胞3〜4次,每次盐水与红细胞之比少于8: I。最后一次以3000〜4000r/min,快速离心20min,尽量吸去生理盐水,按压积红细胞之体积加入等体积的蒸惧水和0.5体积的四氯化碳,剧烈震荡3min,使彻底溶血,用4000r/min离心20min,吸出上层血红蛋白溶液,待用。该方法法制成的Hb液清晰、稳定,膜蛋白及四氯化碳在试管底部,容易分离,但毒性较大,花费时间较长。
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