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高效液相色谱反相柱分离原理
反相高效液相色谱
法的
分离机理
是什么?
答:
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)
使用亲水性的固定相和疏水性的移动相,利用样品分子在移动相和固定相之间的互作用力差异进行分离
。一、基本原理:1.疏水性固定相:反相色谱柱通常使用疏水性的固定相材料,如疏水链状碳氢化合物改性的硅胶或封闭的C18链,使分析物在移动相中具有亲水性,与固定相表面发生疏水作...
反相高效液相色谱
的
原理
答:
在反相液相色谱中,固定相的极小于流动相,洗脱顺序取决于溶质分子的疏水,疏水强的保留时间长
。反相液相色谱是由非极固定相和极流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极固定相和弱极流动相所组成的液相色谱体系相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,典型的流动相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是当...
反向
高效液相色谱法
分离
,定性和定量的
原理
是什么
答:
简单的说:色谱分离的原理就是物质在固定相和流动相之间的分配系数存在差异,经过多次反复吸附解吸或者溶解挥发,最后达到分离
。液相色谱就是流动相是液体。反相指固定相的极性小于流动相的极性。定性通过保留时间定量通过峰面积同一物质在相同色谱条件下保留时间一致,需要对照品比对定性。同一物质的浓度与峰面积成正比例关系,...
高效液相反相色谱
具有什么
原理
?
答:
关于反相色谱的分离机理,
吸附色谱的作用机制认为溶质在固定相上的保留主要是疏水作用,在高效液相色谱中又被称为疏溶剂作用
。根据疏溶剂理论,当溶质分子进入极性流动相后,即占据流动相中相应的空间,而排挤一部分溶剂分子。当溶质分子被流动相推动与固定相接触时,溶质分子的非极性部分或非极性因子会将非极性...
高效液相色谱分离原理
答:
高效液相色谱是一种分离技术,
主要基于液体流动相与液体固定相之间的分配平衡
。两种方法,液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography, LLPC)和化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography, GPC),都涉及试样在两相间的分配。LLPC和GPC的关键区别在于流动相对分离顺序的影响,LLPC流动...
反相高效液相色谱
法
答:
在
反相高效液相色谱
法中,固定相通常是硅胶或聚合物等非极性材料,而流动相则常由水、甲醇、乙腈等极性溶剂组成。当混合物通过
色谱柱
时,各组分在固定相和流动相之间发生分配作用。由于不同组分的分配系数不同,它们在色谱柱中的迁移速度也不同,从而实现
分离
。反相高效液相色谱法具有分辨率高、分离效果好...
高效液相色谱
的
分离原理
答:
会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相(见后),可克服上述缺点。 流动相为
液体
,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行
分离
的。其作用机制是:当试样进入
色谱柱
时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(...
液相色谱
法的
分离原理
是什么?
答:
反相色谱
法一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于
分离
非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代
液相色谱
中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。随着柱填料的快速发展,反相色谱法的...
反相液相色谱
特点
答:
反相液相色谱
以其
高效
、强分离能力和清晰的保留机制,在
液相色谱分离
方法中占据主导地位。特别是在生物大分子、蛋白质和酶的分析中,
反相色谱
正逐渐受到广泛关注。其基本
原理
是固定相为非极性表面,流动相则选择比固定相极性强的溶剂,如硅胶表面键合疏水基团,通过不同组分与疏水基团的疏水作用进行分离。在...
【仪器设备笔记】
高效液相色谱
HPLC-定义、
原理
、部件、类型、用途、图表...
答:
HPLC,全称为
高效液相色谱
,是基于
柱色谱原理
的高级进阶技术。它起源于1960年代,通过从低压玻璃柱发展到高压金属柱,实现了质的飞跃。不同于传统的重力驱动,HPLC在高达400个大气压的高压驱动下,通过流动相(溶剂或混合物)在固定相(微孔颗粒材料)中进行
分离
。![](Sartorius AG)其工作原理是样品通过...
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