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逆转录需要多少RNA
反
转录
要求
rna
浓度达到
多少
答:
1.9-2.2
。根据查询分析测试百科网显示,1.9左右说明RNA的质量较高,可以接着做后面的反转录,但如果大于2.2,说明降解很严重,如果用于定量的话,不需要接着往下做。逆转录(reversetranscription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。
逆转录
体系最多加
多少RNA
?
20ul
的体系吧
答:
那要看你RNA的浓度有多大,
一般1ug就够了
如果浓度大 先将rna用无rna的水稀释
逆转录体系最多加多少RNA
答:
一般A260/ A280比值在1.8~2.0之间,可以满足实验要求。如果在100μl
RNA
原液中取1μl稀释至250μl(DEPC处理的水),测定样品的A260和A280的值,按下列公式计算其浓度:RNA原液浓度=A260×稀释倍数×40(ng/μl)。。
逆转录
体系最多加
多少RNA
?
20ul
的体系吧
答:
2-3ug
RNA
病毒为什么要进行
逆转录
答:
病毒入侵细胞之后的目的是为了复制自己,而其复制的方式就是利用宿主细胞自身的机制。就像一楼所说,某些特定的病毒可以进行逆转录。它们携带的RNA无法被宿主细胞的生物合成系统识别,于是通过逆转录反应将自身携带的
RNA逆转录
成cDNA,然后就可以利用宿主细胞的生物合成系统合成自己
需要
的蛋白,从而产生自己的...
逆转录
时总
RNA
的量对cDNA、PCR结果有没有影响
答:
博凌科为-为你解答:
逆转录
时总
RNA
的量对cDNA、PCR结果看你是准备用cDNA来做什么用。一般来说,如果后面做绝对定量,有影响,如果只是PCR,除了同样循环次数条带亮度不同,可能没有其他影响。
rna
浓度50能进行
逆转录
吗
答:
为了准确地进行基因表达量分析,必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件,但Total RNA中常常混有基因组DNA,并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增,因此会造成解析结果不准确。前面我们介绍了细胞RNA的提取方法,在提取RNA之后,
需要
在逆转录酶的作用下将
RNA逆转录
生成cDNA,进而验证基因的转录水平高低。A...
求RT-PCR 流程和注意事项
答:
博凌科为-为你解答:RT-PCR实验有三步:抽提
RNA
,RT,PCR。要求: 1.做RT前必需测RNA浓度,
逆转录
体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。 2. RT按要求做,一般不会出太大问题。3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,
需要
有完整的cDNA存在,不是单改变Mg2+浓度、退火温度能解决的。 1)RT...
做
逆转录
实验中,配置25ul体系,
需要
Total
RNA
1ug ,请问这1ug怎么换算...
答:
算出总
RNA
的含量,取10ulRNA提取液,稀释300倍,以同体积的水作为对照,用UV-2401紫外分光光度计测RNA260nm处和280nm处的吸收值并计算纯度公式OD260/OD280。浓度公式=总浓度(ng/nl)=(OD260)*(稀释倍数n)*40 如
要
计算很麻烦,所以一般加2-5ul,量多不碍事。自己的经验所得~~...
要做组织提取
RNA
逆转录
为cDNA 进行实时PCR 请问实验组和对照组的组织...
答:
做什么定量半定量都是一样的。样品最好有相同的处理。组织重量上最好接近,不用完全一样。因为抽了
RNA
之后还要定量,我的经验是取2500ng的RNA量做反转,之后就一样了
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